类黄酮代谢是植物次生代谢的重要途径之一,在植物体的生长发育和抵抗外界不良环境等起重要作用。bHLH转录因子,是植物中仅次于MYB家族的第二大转录因子家族,能与MYB转录因子和WD40蛋白形成三联复合体从而参与调控类黄酮代谢途径。本论文重点研究茶树bHLH转录因子及其它们在类黄酮代谢途径中的调控作用。主要结果如下:1.本论文首先从舒茶早转录组数据库中筛出206条茶树CsbHLH基因,并将它们与拟南芥的AtbHLH放在一起构建系统进化树。分析了它们的组织表达特异性和诱导表达特异性。2.筛选了两条茶树CsbHLH转录因子CsTT8和CsMYC基因。利用同源克隆的方法,扩增得到CsTT8和CsMYC基因读码框,CsTT8开放阅读框为2058bp长,编码686个氨基酸;CsMYC开放阅读框为1998bp长,编码666个氨基酸。3.生物信息学分析表明,茶树CsTT8和CsMYC与拟南芥AtTT8和AtMYC1同源。酵母双杂结果显示CsTT8和CsMYC均能与CsMYB5和Cs WD蛋白互作;CsMYC可以互补gl3的症状。这些结果提示,它们很可能参与类黄酮代谢途径中的调控作用。4.利用荧光定量PCR技术,检测了两条基因的组织表达特异性和诱导表达特异性。结果表明,两个基因均在地上部分高表达,在根中低表达;CsTT8与CsMYC在各种激素和非生物胁迫诱导下存在表达差异。5利用烟草遗传转化体系验证CsTT8与CsMYC的功能,结果显示,与对照相比较,CsTT8过表达的烟草中花青素和PA含量略上升,而CsMYC高表达的烟草花青素和PA含量均下降,其花色为白色,花朵整体较野生型小。实时荧光定量PCR结果表明,转CsbHLH基因的烟草花中涉及类黄酮生物合成途径的结构基因大部分被下调。