【摘 要】
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一、真核表达TRAIL杀伤化疗后残存瘤细胞和耐药细胞作用的研究;目的:探讨不同化疗药物作用后的残存小鼠肝癌细胞H22对TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导凋亡的敏感性,以及TRAIL
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一、真核表达TRAIL杀伤化疗后残存瘤细胞和耐药细胞作用的研究;目的:探讨不同化疗药物作用后的残存小鼠肝癌细胞H22对TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导凋亡的敏感性,以及TRAIL对药物抗性H22细胞的杀伤作用.结论:TRAIL不仅能有效杀伤ADM或MMC作用后的残存H22肿瘤细胞,而且能杀伤ADM抗性的H22肿瘤细胞.5-FU与TRAIL联合不会提高5-FU杀伤H22细胞的作用,处于G0/G1期的H22肝癌细胞对TRAIL诱导的凋亡不敏感.二、TRAIL、CH50多肽及endostatin多基因联合化疗治疗小鼠肝细胞肿瘤的研究;目的:观察TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)、CH50多肽及endostatin基因的真核表达质粒mTRAIL-pcDNA3.1(pTRAIL)、pCH510、endostatin-pcDNA3.1(pES)联合化疗治疗小鼠肿瘤的疗效,探讨肿瘤综合治疗的可行性.结论:MMC+pTRAIL+pES+pCH510能有效抑制小鼠肝细胞肿瘤生长,是一种极具潜力的肿瘤综合治疗配伍方案.三、小鼠可溶性TRAIL原核表达质粒msTRAIL-pRSET的构建与表达;目的:应用原核表达系统大量制备可溶性TRAIL蛋白.方法:以小鼠全长TRAIL真核表达质粒为模板,PCR扩增其可溶性片段(114aa~291aa),插入原核表达载体pRSET-B中,得到目的克隆,将其导入工程菌BDPS中,经IPTG诱导,SDS-PAGE检测重组蛋白的表达.结论:构建的msTRAIL-pRSET能够表达目的蛋白.四、利用比重分离的H22瘤细胞群体药物敏感性的初步分析;目的:采用按比重分离细胞的方法,从一个侧面探讨肿瘤细胞异质性的表现,为肿瘤的个体化治疗探索新的思路.结论:细胞比重与药物敏感性有一定的关系,对ADM与5-FU都敏感的H22细胞比重≥1.077.
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