目的应用大鼠脉络丛上皮细胞系-Z310细胞建立体外血脑脊液屏障（Blood cerebrospinal fluid barrier,BCSFB）模型,采用生物化学、细胞生物学和分子生物学等方法,探讨镧暴露下,核因子E2相关因子（Nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2）通路在抵抗氧化应激和维持BCSFB功能中的重要作用,以期为镧导致中枢神经系统损伤的作用研究提供新的理论依据。方法1使用0（对照组）、0.125、0.25、0.5 mmol/L氯化镧（Lanthanum chloride,LaCl3）及同时给予40μmol/L Nrf2激活剂叔丁基对苯二酚（Tert-butylhydroquinone,tBHQ）处理Z310细胞。2应用CCK-8法、细胞坏死率测定试剂盒分别检测Z310细胞存活率和坏死率,使用倒置显微镜和细胞核染色法观察Z310细胞形态变化。3采用Z310细胞构建体外BCSFB培养模型,使用电阻仪检测体外BCSFB模型跨上皮细胞电阻（Transepithelial electrical resistance,TEER）变化。4流式细胞术检测活性氧（Reactive oxygen species,ROS）变化,生化法检测细胞内CAT和GSH-Px活力变化。5细胞免疫荧光法检测Nrf2、xCT、occludin等蛋白在Z310细胞分布情况。6采用western blot法检测Z310细胞内Nrf2、NQO1、occludin等蛋白表达,及炎症因子IL-1β、TNF-α表达。7应用real time-PCR法检测Nrf2和及其调控的下游基因Nqo1和Ho1 mRNA表达。结果1镧诱发氧化应激对体外BCSFB模型损伤的影响:1)与对照组比较,LaCl3处理Z310细胞后体外BCSFB模型TEER显著降低,差异均具有统计学意义,其中0.5 mmol/L LaCl3组TEER降低62.84%;LaCl3处理Z310细胞后细胞边界不清、细胞间连接减少,细胞活力下降、细胞坏死率升高。2)LaCl3处理对Z310细胞抗氧化能力的影响:Z310细胞内ROS水平随LaCl3处理浓度升高而增加;抗氧化酶CAT、GSH-Px活力降低,其中0.5 mmol/L LaCl3组CAT、GSH-Px活力分别降低56.02%和72.04%。3)与对照组比较,不同浓度LaCl3处理Z310细胞后Nrf2和NQO1、HO-1 mRNA和蛋白表达与对照组比较明显降低（P＜0.05）。2 tBHQ拮抗镧致Z310细胞氧化损伤的作用:1)与不同浓度LaCl3组比较,各tBHQ干预组Z310细胞内Nrf2蛋白表达显著增加,其中tBHQ+0.5 mmol/L LaCl3组细胞内Nrf2蛋白表达是0.5 mmol/L LaCl3组的2.54倍;Nrf2调控的下游细胞抗氧化蛋白HO-1、xCT、NQO1等表达均增加,差异均具有统计学意义。2)与各LaCl3组比较,tBHQ干预后Z310细胞存活率升高,且体外BCSFB模型TEER增加,其中tBHQ+0.5 mmol/L LaCl3组TEER高于0.5 mmol/L LaCl3组26.93%。3 Nrf2通路在镧致BCSFB紧密连接蛋白表达改变中的作用:1)与各LaCl3组比较,tBHQ干预后LaCl3处理的Z310细胞Nrf2蛋白表达明显增加,且细胞内ROS水平显著降低（P＜0.05）。2)与对照组比较,不同浓度LaCl3处理Z310细胞后MMP9蛋白表达升高,同时TIMP1蛋白表达显著下降;BCSFB紧密连接蛋白occludin、ZO-1、JAM1等表达显著降低（P＜0.05）。3)活化Nrf2后可减弱LaCl3致Z310细胞内MMP9蛋白表达增加,同时紧密连接蛋白occludin、ZO-1、JAM1等蛋白表达增加。结论镧暴露可通过下调Nrf2通路表达,降低Z310细胞抗氧化能力造成ROS水平升高导致Z310细胞损伤;此外,还可导致MMP9蛋白表达增加而降解紧密连接蛋白occludin、ZO-1、JAM1等,最终导致TEER降低,体外BCSFB模型损伤。图32幅;表6个;参162篇。