【摘 要】
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副猪嗜血杆菌是危害中国乃至全世界猪的重要疫病,在实际生产中给现代化生猪养殖造成了巨大的困扰。副猪嗜血杆菌血清型繁多而且毒力因子比较复杂,加之对它的致病机理和毒力因
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副猪嗜血杆菌是危害中国乃至全世界猪的重要疫病,在实际生产中给现代化生猪养殖造成了巨大的困扰。副猪嗜血杆菌血清型繁多而且毒力因子比较复杂,加之对它的致病机理和毒力因子之间关系还不透彻,对疾病防控造成了严重的威胁。因此,现在许多研究重点探索副猪嗜血杆菌的毒力因子,包含对外膜蛋白、脂多糖、神经氨基酶等的研究。本试验的主要目的是为了研究木犀草素对H.parasuis毒力因子表达的影响,为兽医临床对该病的预防和控制提供新的方向和理论基础。根据美国临床实验室标准化委员会(CLSI)提供的标准方法,检测木犀草素中药单体对H.parasuis的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),发现木犀草MIC的值为8μg/mL,MBC的值为16μg/mL,说明木犀草素对H.parasuis有较好的抑菌作用,且H.parasuis对木犀草素中药单体没有产生耐药性。通过荧光定量(PCR)的方法,研究木犀草素对H.parasuis的生长及各类潜在的毒力相关基因表达量的影响,采用不同浓度的木犀草素对H.parasuis 10个相关基因表达量进行试验。结果发现木犀草素能够有效抑制H.parasuis的外膜蛋白基因(OmpP-5和OmpP-2)、细胞致死膨胀素基因的cdtC亚基、生物膜形成相关基因(mviN)、荚膜形成相关基因(cap D)的表达;但是对H.parasuis的溶血操纵子基因(hhd A和hhd B)、细胞致死膨胀素基因的cdtA亚基、生物膜形成相关基因的gaIU亚基、转铁结合蛋白(tbpA)的表达没有起到抑制作用,有的甚至不减反增。木犀草素中药单体对H.parasuis毒株毒力有关的不同基因的表达影响不同,表现出较好的抗菌活性,特别是对H.parasuis毒株的mviN基因,能使mviN基因相对表达量下降,呈现逐级递减现象,且呈现出能够及显著地降低mviN基因相对表达量(P<0.01)。试验表明木犀草素对H.parasuis 10个相关基因表达量的影响不尽相同,且木犀草素对标准株H.parasuis毒力基因表达有良好的抑制作用,从而影响H.parasuis毒力,可以作为H.parasuis毒力抑制剂研究。
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