乳清蛋白酶解物对干酪乳杆菌生长影响的研究

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益生菌是指投入后通过改善宿主肠道菌群生态平衡而发挥有益作用,达到提高宿主健康水平的活菌制剂及其代谢产物。益生菌在货架期内的活菌数目不得少于106CFU/mL,否则不能起到预期改善宿主健康水平的作用。乳酸菌营养需求苛刻,但自身蛋白水解能力很弱。本研究选用乳清蛋白浓缩物(WPC80)为原料,以胰蛋白酶进行水解,探讨乳清蛋白水解物对干酪乳杆菌的促生长作用,希望能找出乳清蛋白水解物中促进干酪乳杆菌生长的主要成分,同时为乳清蛋白的有效利用、干酪乳杆菌高效培养技术的完善提供一定的理论依据。1.经对干酪乳杆菌生长特性的研究可以得知干酪乳杆菌4h以后进入对数生长期,12h以后到达对数生长期的末期。2.利用胰蛋白酶水解乳清浓缩蛋白80,选水解温度(℃)、pH、底物质量浓度(g/100ml)、酶与底物浓度比E/S(%)为影响因素,水解度为指标。单因素试验确定出较优因素范围后,采用L9(34)正交表,设计正交试验。结果表明水解温度53℃,pH8.0,E/S3%,底物质量浓度4.0g/100ml条件下,DH达12.67%。3.添加乳清蛋白酶解液(WPH)的组,活菌数较对照组(MRS)均有显著增加,尤其添加水解时间5h和7h的WPH促生长效果更显著。SDS-PAGE电泳分析表明了随水解时间的增加,蛋白逐渐被酶解成小的片断;超滤部分均表现了增菌作用,分子量3KD以下的酶解产物促生长作用最强。4.以上研究发现乳清蛋白酶解液对干酪乳杆菌有不同程度的促生长作用,基于以上研究,又比较了不同替代量乳清蛋白水解液对干酪乳杆菌生长的影响。结果表明:替代量为40%时,对干酪乳杆菌的促生长作用最为显著,对数生长期的末期活菌数分别高达8.58log CFU/mL。甚至达70%替代量时,活菌数与对照组之间的活菌数数量也相当。
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