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采用田间试验方法和室内分析手段相结合的方法,对银杏枝叶的生物学特性、银杏黄酮苷和萜类内酯的生物合成和积累规律,栽培措施对叶用银杏的产叶量和银杏黄酮苷、萜类内酯生物合成和积累的影响进行系统研究,研究结果表明: 1.银杏黄酮苷在叶中生物合成和积累,春季叶银杏黄酮苷含量较高,夏秋季较低且稳定,光照充足有利于银杏黄酮苷的生物合成和积累。施肥和接种菌根对银杏黄酮苷的生物合成和积累影响较小,干旱胁迫没有影响。 2.银杏萜类内酯在银杏不同器官中的含量从高到低依次为:芽>叶>根>茎,韧皮部>木质部;白果内酯在叶和芽中所占比例较高,其含量相当萜类内酯总量的1/2,而在根茎中的含量相当总量的约1/3,银杏内酯(主要是银杏内酯B和C)在根茎中所占比例显著高于在叶中所占比例。银杏萜类内酯在叶和根中积累,可能在根中生物合成,通过木质部向叶中运输。白果内酯和银杏内酯可能有一共同生物合成前体GGPP。春季银杏叶萜类内酯含量较低,然后逐渐增加,到夏末秋初达最高值,此后逐渐下降,银杏根茎中萜类内酯含量年变化与叶中相类似,但在冬季休眠期萜类内酯含量比春初略高,银杏碳水化合物含量的季节变化与萜类内酯含量的季节变化相类似。幼树叶中萜类内酯含量显著高于成年大树叶,后者比前者底40%~60%,老龄叶中萜类内酯含量比幼龄叶高。光质对银杏萜类内酯的生物合成有显著影响,紫膜下生长的银杏苗萜类内酯含量为3.89mg/g,是对照(白膜)2.1mg/g的1.8倍,遮荫处理对银杏萜类内酯含量影响较小。 3.对银杏幼苗接种VA菌根,叶面喷施N肥和P肥,能显著改善植株内N、P供应,增加苗木叶量和总干重,并有利于银杏萜类内酯的生物合成和积累。对银杏幼苗进行干旱胁迫处理,会使萜类内酯含量下降,接种VA菌根能促进银杏萜类内酯生物合成和积累。对银杏幼苗喷施矮壮素(CCC)能显著增加萜类内酯含量,2000PPM矮壮素处理下的银杏叶、根、茎中萜类内酯含量分别比对照增加111.9%、74.3%和31.5%,其中白果内酯分别比对照增加122.5%、194.5%和127.1%。 4.不同栽培品种间银杏叶量和银杏黄酮苷与萜类内酯含量存在显著差异,但不同指标在栽培品种间表现不一致。秋季采叶时间过早,对第2年枝叶生长有不利影响,结合银杏药效次生代谢物含量的年变化规律,建议在9月中下旬采收银杏叶。对叶用银杏1年2次采收叶能增加当年银杏叶产量近2/3,但对第2年枝叶生长有显著负作用,2年生枝和新梢基径减少10%~30%,新梢长减少12~28%,发枝率降低15~50%,叶片数减少10%~20%。在银杏树冠形成后,同时加强水肥管理,可考虑进行2次采叶。 此外对银杏内酯和白果内酯的定性定量分析方法进行研究,用20%的甲醇水溶液提取银杏叶中的银杏内酯和白果内酯,用硅胶柱纯化,甲苯与丙酮混合液洗脱,经硅烷化后质谱定性,气相色谱定量,该方法对白果内酯与银杏内酯A、B的回收率分别为93.01%,96.32%,94.68%,相对变异系数分别为3.75%,3.88%,4.23%,气相色谱分析峰基线完全分离。