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内吗啡肽（endomorphins,EMs）是新近发现的高激动性、高选择性、内源性的μ-阿片受体（MOR）激动剂,参与了体内诸多生理功能的调节,尤其是痛觉调节,被视为潜在的可替代吗啡的深层次痛觉调节药物。因其结构柔性以及并未明确的构效关系,大大阻碍了以其结构为模板的痛觉调节药物的研发。本文旨在通过构建C-末端空间构象限制的EMs类似物,降低第三芳香药效团（Phe4的侧链）的结构柔性,并探讨其构效关系。我们以非芳香族氨基酸替换内吗啡肽1（Tyr1-Pro2-Trp3-Phe4-NH2,EM1）,内吗啡肽2（Tyr1-Pro2-Phe3-Phe4-NH2,EM2）的Phe4,C-末端以苄基结尾,构建了一系列空间结构限制的C-末端EMs类似物。放射配体受体结合实验表明,类似物7,8,14,21,22在纳摩尔水平表现出强于母体或与母体相似的激动活性。这些类似物消除C-末端酰氨,地址序列发生明显改变,仍然保持很高的MOR结合活性,这一结果对于探讨C-末端的构效关系有着非常显著的意义。用[S]-α-甲基苯乙氨或苯丙酰氨替换苄基得到类似物9,10,23,24 MOR结合活性相比母体有所下降,然而,苯胺,L-苯基甘氨酸,D-苯基甘氨酸替换苄基得到的类似物11,12,13,25,26 MOR结合活性大大降低。这一结果表明,正确限制第三芳香药效团的空间位置是EMs与MOR发生作用的一个至关重要的因素。在所有类似物中,最值得关注的类似物（如:类似物3,7,8,21等）表现出以下特征:（ⅰ）高MOR激动活性,高MOR选择活性;（ⅱ）比母体高2-4倍的GPI/MVD激动活性;（ⅲ）镇痛效果比母体强3-4倍,且作用时间相对延长;（ⅳ）能剂量依赖的降低大鼠的系统动脉压和心率;（ⅴ）能剂量依赖的促进结肠的自主收缩;（ⅵ）二维核磁以及DGⅡ软件构象模拟研究类似物在溶液中的构象,结果表明:第四位非芳香性氨基酸的手性决定了第三芳香药效团以及其他药理学中心空间排列是否适合与MOR结合。综上所述,这些含有非典型空间结构限制C-末端的内吗啡肽类似物为进一步开发新的高效MOR激动