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目的：通过建立新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(Hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)模型观察海马神经元中的自噬现象及Ca-A/K通道亚基的改变，初步探讨自噬抑制剂3-Methyladenine（3-甲基腺嘌呤，3-MA）及自噬激活剂Rapamycin（雷帕霉素）在HIBD后海马神经元自噬发生中对Ca-A/K通道亚基的作用及可能机制。方法：采用7日龄SD（Sprague Dawley）新生大鼠，根据改良Rice-Vannucci法建立HIBD模型。将新生大鼠随机分为假手术组（Sham组）、缺氧缺血组（HIBD组）、3-MA干预组（3-MA组）及雷帕霉素组（RAPA组）。选取HIBD后0h、1h、3h、6h、12h、24h、48h七个时间点作为取材点：采用HE染色法从细胞水平了解HIBD后各组海马组织损伤情况；通过RT-qPCR法测定HIBD后海马神经元自噬标记分子（LC3、Beclin-1）及Ca-A/K通道亚基（GluR1、GluR2）mRNA水平的变化，并通过Western Blot方法从蛋白水平进一步检测Ca-A/K通道亚基（GluR1、GluR2）浓度的改变；应用免疫组织化学法对HIBD后海马组织LC3、GluR1及GluR2分子的表达在细胞水平进行定位。结果：1. HE染色结果显示，Sham组左侧海马神经元呈锥形或圆形，细胞3～4层，致密有序，胞核居中且圆满透明，仅见少量神经元变性或凋亡；HIBD组海马神经元细胞结构不完整、排列紊乱，细胞肿胀、破裂，轮廓模糊、界限不清，细胞明显丢失，海马区神经细胞疏松细胞间距增大；3-MA组海马神经元损伤较HIBD组轻，而RAPA组损伤加重，神经元凋亡、坏死及细胞缺失的范围较HIBD组大。2. RT-qPCR法显示，与Sham组相比，HIBD组LC3、 Beclin-1及GluR1表达上升，6h表达即开始增加，12h增加较明显，24h达到高峰，持续至48h仍明显升高(P<0.05)，而GluR2则相反，呈下降趋势；与HIBD组相比，3-MA组LC3、Beclin-1、GluR1表达减少，0h、1h未见明显差异，24h表达最低，48h仍处于较低水平(P<0.05)，GluR2的表达则增加；与HIBD组相比，RAPA组LC3、Beclin-1、GluR1的表达于24h达高峰，48h仍维持在较高水平(P<0.05)，GluR2的表达降低。3. Western blot发现，与Sham组相比，HIBD组GluR1表达增加，于6h开始出现变化，24h达到高峰，持续至48h仍存在明显升高(P<0.05)；与Sham组比，HIBD组GluR2表达减少，在6h的时候出现统计学差异，24h最低，48h仍维持在较低水平(P<0.05)。4.免疫组织化学染色法显示，各组左侧海马神经元中均有LC3、GluR1及GluR2的表达；LC3在细胞内的表达主要位于细胞质，而GluR1、GluR2的表达则主要在细胞膜；与Sham组相比，HIBD组LC3、GluR1的表达水平处于较高水平，而GluR2的表达较低甚至不表达；与HIBD相比，3-MA组海马神经元细胞LC3、GluR1的表达减少，GluR2的表达反而增加，而RAPA组结果正好相反。结论：1. HIBD后海马神经元急性期即出现细胞损伤，表现为细胞水肿，核溶解及碎裂，细胞空泡化，部分细胞分界模糊，并且涉及凋亡、自噬及坏死三种形式。2. HIBD后自噬标记分子LC3、Beclin-1及Ca-A/K通道亚基GluR1、GluR2的表达均发生变化。3.各组左侧海马神经元均有LC3、GluR1及GluR2的表达，但表达的定位及数量存在差异性。4.应用3-MA、雷帕霉素干预自噬后，Ca-A/K通道亚基表达发生改变，提示Ca-A/K通道可能参与自噬的发生。