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近年来,兰科植物及其菌根真菌共生关系的研究成为一个热门话题。在自然条件下,兰科植物种子的萌发和植株的生长都离不开菌根真菌的参与。黄花白及(Bletilla ochrace Schltr.)是一种地生兰科植物,也是贵州省境内重要的中药材之一。近年来由于人们的过度采挖和生境的破坏,导致其野生资源日趋濒危。本研究通过对兰科植物黄花白及菌根真菌的分离,将分离的的菌根真菌与黄花白及种子重新构建建立共生体系,筛选并鉴定出对黄花白及种子有促生作用的真菌种类,并尝试建立促生真菌Sebacina sp.绿色荧光蛋白(GFP)标记的遗传转化体系。上述研究将为深入研究兰科植物与菌根真菌的相互作用,进一步研究兰科植物与内生真菌之间的关系提供新的思路和借鉴,也为菌根真菌在野生兰科植物人工驯化中的作用提供理论依据。本研究具体研究结果如下:1.采用传统的组织培养方法,分离黄花白及的菌根真菌,通过形态学和分子学鉴定两株有促生作用的菌根真菌,分别为Epulorhiza sp.和Sebacina sp.。2.分别将Epulorhiza sp.和Sebacina sp.两株菌根真菌与黄花白及种子进行共生萌发,Epulorhiza sp.和Sebacina sp.两株菌根真菌对黄花白及种子的萌发具有显著的促进作用,比对照的萌发率分别高出8.61%和18.43%,并且将共生体切片显微观察,在黄花白及萌发的种子组织中观察到典型的兰科菌根结构。3.建立Sebacina sp.菌根真菌原生质体的制备方法,原生质体制备的优化条件为:液体YEPG中培养了60h的新鲜幼嫩菌丝,在28℃下,使用裂解酶(10mg/ml)与崩溃酶(20mg/ml)作为组合酶解液、1.2mol/L KCl酶解1.5h,原生质体产量达到5×107个/ml。4.本研究对Sebacina sp.的原生质体进行CaC12-PEG介导的GFP基因的遗传转化和对Sebacina sp.菌丝进行根癌农杆菌介导(ATMT)的GFP基因的遗传转化的初步试验,确定其对潮霉素的敏感性,并探索了一些遗传转化的条件,为进一步得到转化子奠定重要基础。