【摘 要】
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在2019年新型冠状病毒爆发后,立即引起了全世界的极大关注,生命科学和医学界纷纷对这次的新型冠状病毒进行了全方面的研究,目前已经将新型冠状病毒的结构研究透彻,并且研制出了预防新型冠状病毒的疫苗并成功让广大人民群众接种注射。对于新型冠状病毒是如何进攻人体防御系统的,也在进行积极地研究。研究已经显示,新型冠状病毒的基因组是单链RNA,而先天性免疫系统中的RIG-I样受体则主要识别细胞质中病毒复制过程中
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在2019年新型冠状病毒爆发后,立即引起了全世界的极大关注,生命科学和医学界纷纷对这次的新型冠状病毒进行了全方面的研究,目前已经将新型冠状病毒的结构研究透彻,并且研制出了预防新型冠状病毒的疫苗并成功让广大人民群众接种注射。对于新型冠状病毒是如何进攻人体防御系统的,也在进行积极地研究。研究已经显示,新型冠状病毒的基因组是单链RNA,而先天性免疫系统中的RIG-I样受体则主要识别细胞质中病毒复制过程中产生的RNA,在新型冠状病毒对人体发起进攻时,最先开启防御机制的就是先天性免疫系统,先天性免疫系统不仅可以在早期检测病原体而且可以抑制病原体的生长。本论文主要研究的是SARS-CoV-2膜（M）蛋白与先天性免疫系统RIG-I样受体中RIG-I蛋白和MAVS蛋白的表达纯化,以及探究这三种蛋白之间是否可以相互作用,本文使用哺乳动物真核表达系统配合凝胶过滤层析的方法来表达纯化SARS-CoV-2膜（M）蛋白和MAVS蛋白,使用大肠杆菌原核表达系统配合凝胶过滤层析的方法来纯化RIG-I蛋白,然后通过pull down方法,以及让蛋白直接混合通过凝胶过滤层析的方法来探究这几种蛋白之间是否存在直接的相互作用。结果显示,本论文已成功掌握了SARS-CoV-2膜（M）蛋白和RIG-I蛋白的表达载体的构建方法,并且已经成功的纯化出了将SARS-CoV-2膜（M）蛋白和RIG-I蛋白,但是MAVS蛋白目前还没有纯化出来,SARS-CoV-2膜（M）蛋白和RIG-I蛋白进行pull down,结果显示两种蛋白并没有结合,将SARS-CoV-2膜（M）蛋白和RIG-I蛋白直接混合孵育,并且经过凝胶过滤层析,结果同样显示,两种蛋白没有结合。综上所述,本文进行了SARS-CoV-2膜（M）蛋白和RIG-I蛋白的表达纯化,并且初步探索了SARS-CoV-2膜（M）蛋白和RIG-I蛋白是否能够相互作用,这可以为以后研究新型冠状病毒的发病机制提供一定的思路,也可以对其他类型的冠状病毒结构的探索提供帮助。
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