黄芪是一种豆科多年生的草本植物,主要产于我国黑龙江、山西、甘肃、内蒙等地区。黄芪富含皂苷类、黄酮类、多糖类等多种具有活性的成分,具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、抗病毒、降血糖和保护心血管等多方面功效。本文以干燥蒙古黄芪为原料,采用水提醇沉的方法,分离得到黄芪粗多糖,对黄芪粗多糖进行Sevag法除蛋白、乙醇脱色、Sephadex G-100柱层析纯化得到水溶性多糖APS;理化试验测定其可溶性糖含量为83.86%;高效液相色谱分析,结果表明APS分子量大约为6.93×105 Da,气相色谱分析结果表明,APS单糖组成主要为鼠李糖、木糖、甘露糖、阿拉伯糖和葡萄糖,其摩尔比为1:1.47:1.86:5.71:175.19。通过单因素试验和正交试验,建立了黄芪寡糖的最佳酸解条件:在降解温度为80℃,降解时间2h,H2SO4浓度为1 mol/L,底物浓度为20mg/mL。通过硅胶柱层析对降解液进行分离纯化,制备得到黄芪寡糖纯品AOS,利用高效液相色谱分析鉴定了其纯度,结果显示AOS的含量为91.9%。经红外光谱(FT-IR)、气相色谱(GC)、质谱(ESI-MS)、核磁共振波谱(1H NMR、13C NMR)、高碘酸氧化和Smith降解等对寡糖的结构进行分析,结果表明,黄芪寡糖的单糖组成和红外光谱特征与APS相似,主要由鼠李糖、木糖和葡萄糖组成,摩尔比为1.4:1:1.9,由1→2糖苷键,1→6糖苷键或1→3糖苷键连接单糖结构单元,质谱分析结果表明黄芪寡糖的质荷比为661.67 m/z,核磁共振结果与气相色谱结果基本一致,制备的黄芪寡糖为一种寡聚四糖。采用环磷酰胺建造小鼠免疫缺陷模型,研究黄芪寡糖的升白活性。结果发现:黄芪寡糖能明显提高小鼠外周血白细胞数量、血红蛋白浓度、红细胞数量和骨髓核细胞数量,并且具有一定的量效关系;其胸腺指数同脾脏指数均显著提升;黄芪寡糖和黄芪多糖糖粗品极显著升高小鼠粒细胞-巨噬细胞的集落刺激因子GM-CSF含量(p<0.05)。表明黄芪寡糖对环磷酰胺引起的小鼠白细胞减少症有明显缓解作用,且黄芪寡糖的效果优于黄芪多糖。