实验背景2型糖尿病（T2DM）患病率逐年升高，因其血管病发症而导致的缺血性心脏病发病率也随之升高，且糖尿病可导致心肌易损性增加，从而进一步加重心肌缺血/再灌注（MI/R）损伤。研究显示，白藜芦醇（RSV）具有多种心血管保护作用，其中包括减轻心肌缺血/再灌注损伤，目前认为其主要是通过增加NO生成的预处理效应而发挥心肌保护作用，但具体机制仍未完全阐明。据报道，白藜芦醇能够上调培养的脂肪细胞及正常小鼠的脂联素水平及多聚化。因此，脂联素或可成为RSV对缺血心肌发挥保护作用的中介分子。脂联素（APN）是一种血浆含量丰富的脂肪细胞因子（0~30μg/ml），具有抗炎、抗动脉粥样硬化、抗糖尿病和心血管保护等作用。动物实验证实，补充外源性脂联素球状片段（gAPN）能够显著减轻正常、脂联素基因敲除及糖尿病小鼠的心肌缺血/再灌注（MI/R）损伤。但是，脂联素在循环血液中只有极少量以单体形式存在，而主要形成三聚体（LMW）、六聚体（MMW）和高分子量聚合体（HMW）等三种形式的聚合体，且三种聚合体分别有各自的作用靶点和生物学活性。流行病学调查显示，糖尿病和冠心病患者HMW水平显著下降，且血浆HMW含量或HMW占总脂联素的比例（HMW%）与糖尿病性缺血性心脏病的危险程度显著相关，故内源性脂联素含量及其多聚化水平（即HMW%）的升高更有益于预防和治疗糖尿病性心血管病。因此，运用白藜芦醇提高内源性脂联素表达及多聚化或可成为治疗糖尿病冠心病的新策略。但是，在2型糖尿病时，白藜芦醇是否能够通过逆转其低脂联素血症从而在缺血/再灌注损伤时发挥心肌保护作用仍不清楚。实验目的1.通过建立2型糖尿病小鼠心肌MI/R模型，验证白藜芦醇饲喂是否能够减轻2型糖尿病小鼠心肌缺血/再灌注损伤。2.如果白藜芦醇饲喂能够减轻T2DM小鼠MI/R损伤，则进一步阐明其可能的机制，即RSV是否能够上调T2DM小鼠的血浆及脂肪脂联素水平及其多聚化，从而激活脂联素信号通路发挥对缺血心肌的保护作用。实验方法1.模型的建立采用喂养高脂饮食结合小剂量链脲佐菌素(STZ)建立T2DM小鼠模型。通过检测体重、血糖、空腹血浆胰岛素水平以及口服葡萄糖耐量试验（OGTT），确认模型是否建立成功。采用结扎心脏冠状动脉左前降支30min、再灌注3h或24h建立MI/R模型。2.给药途径及方法T2DM小鼠模型建立成功后立即给予RSV (10mg/kg)每日1次灌胃，连续3周。 AMPK抑制剂Compound C（20mg/kg）于术前1h腹腔注射。3.心肌缺血/再灌注损伤及脂联素水平的检测用伊文氏蓝/TTC双重染色法检测心梗面积，小动物超声检测心功能，TUNEL法检测心肌细胞凋亡，ELISA法检测caspase-3活性、血浆脂联素水平，Western blot法检测心肌组织AMPK和p-AMPK水平、脂肪组织DsbA-L和脂联素的含量及血浆和脂肪组织HMW水平。实验结果1.小鼠T2DM及MI/R模型的建立喂养高脂饮食结合小剂量STZ能够成功建立T2DM小鼠模型。高脂饲喂后小鼠体重显著增加、血糖显著升高（饲喂8周后血糖>11.0mmol/L）、空腹血浆胰岛素水平明显升高、口服葡萄糖耐量显著降低，符合T2DM小鼠造模标准。MI/R后，经伊文氏蓝/TTC双重染色，心肌组织分别被染成代表正常组织的蓝色区、代表缺血组织的红色区和代表梗死组织的白色区，证明模型建立成功。2. RSV饲喂对T2DM小鼠MI/R损伤的影响RSV饲喂能够显著减轻T2DM小鼠MI/R损伤，减小心梗面积、增强心功能、减少心肌细胞凋亡（P<0.01），降低caspase-3的活性（P<0.05）。3. RSV减轻T2DM小鼠MI/R损伤的机制T2DM小鼠脂联素水平降低、MI/R损伤加重（P<0.01）。RSV能够通过增加脂肪组织DsbA-L的表达（P<0.05），上调血浆及脂肪组织APN水平及其多聚化（P<0.01），增加HMW含量。AMPK抑制剂Compound C可显著抑制AMPK的磷酸化，降低心肌p-AMPK的水平（P<0.05），从而明显削弱RSV对T2DM小鼠MI/R损伤的保护作用，表现为心梗面积显著增大（P<0.01）、心功能明显下降、心肌细胞凋亡明显增加、caspase-3的活性明显升高（P<0.05）。结论1.白藜芦醇饲喂可显著减轻T2DM小鼠心肌缺血/再灌注损伤。2.白藜芦醇可通过上调T2DM小鼠血浆及脂肪组织脂联素水平及多聚化并进一步激活脂联素信号通路，减轻T2DM小鼠MI/R损伤。