木质素是由不同的木质素单体聚合而成的,其含量和单体组成与植物体的综合利用密切相关。木质素单体生物合成涉及到许多酶的参与,其中HCT(Shikimate/Quinate Hydroxycinnamoyltransferase)是研究最晚的一种木质素合成酶,是控制木质素H-单体与G/S-单体相互转化的关键酶。我们从欧美杨107茎次生木质部RNA中克隆出hct基因片段并连接到载体上,测序并对序列进行了分析。主要结果包括：1.利用2×CTAB法提取了欧美杨107(Populus xeuramericana cv."74/76")的基因组DNA；通过Primer Premier5.0软件设计了2对引物用于hct的扩增,筛选出了合适的引物,并确定了扩增条件。2.从欧美杨107的次生木质部中提取总RNA,经RT-PCR扩增出了一条约700bp左右的片段,与设计大小相符。将目的DNA片段回收并与pMD20-T载体连接,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,在LB/Amp/X-gal/IPTG的固体培养基上培养,筛选出白色单菌落。提取白色单菌落中的质粒,并进行特异引物扩增和限制性内切酶酶切鉴定,最后对重组质粒进行测序鉴定。3.测序结果分析表明,目的片段正向插入到了pMD20-T载体中,大小为709bp。该片段与毛果杨Populus trichocarpa全序列的同源性高达98%,与Populus trichocarpa的HCT1的同源性为91%。扩增片段内包含一个708bp的开放阅读框,编码的氨基酸序列属于转移酶超家族,与毛果杨两个HCT的氨基酸序列的同源性分别为98%和91%,并含有HCT共有的DFGWG序列,确定该片段是木质素合成酶基因hct片段。该核苷酸序列已登录到GenBank,其登录号为FM202091。将重组质粒命名为pMD20-T-hct,并留实验室保存作后续研究。