背景及目的视神经脊髓炎谱系疾病（Neuromyelitis optica spectrum disorder,NMOSD）是一种主要累及视神经和脊髓、以高复发率和高致残性为特点的中枢炎性脱髓鞘性疾病。NMOSD患者自然病史通常为多相病程,且随着发病次数的增加,残疾系数则越高,而早期诊断,尽早干预可提高NMOSD患者生活质量。NMOSD的诊断有赖于患者的临床表现、实验室检查、影像学检查等,其中针对水通道蛋白（Aquaporin-4,AQP4）自身抗体检测至关重要。2005年,AQP4被证明是视神经脊髓炎免疫球蛋白G（NMO-Ig G,或AQP4-Ig G）的抗原靶点,这一发现促进了视神经脊髓炎疾病扩展为视神经脊髓炎谱系疾病,并与MS等其他脱髓鞘疾病分开来。2015年IPND小组NMOSD诊断标准将基于细胞的免疫荧光法（cell-based assay,CBA）作为检测AQP4抗体的金标准;也有一些实验室利用高表达该抗原的神经组织（如猴神经）切片,即间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence assay,IIFA）以检测AQP4抗体。但上述2种检测方法对实验室条件以及检测人员的要求较高,无法应用于基层医院;同时检测的周期较长,无法辅助急症患者的快速诊断。部分实验室使用重组AQP4蛋白作为抗原,利用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测AQP4抗体,但AQP4是一种四聚体的跨膜蛋白,正确的空间构象结构对自身抗体的识别至关重要,而在重组蛋白的表达过程中往往因为翻译折叠不正确,形成错误的构象,影响检测的特异性及灵敏性。本研究所采用的免疫斑点法是利用纯化AQP4-细胞膜蛋白复合物作为抗原以检测患者样本中的特异性AQP4抗体,该方法保留了AQP4空间构象,且检测耗时短,过程不需依赖特殊的仪器设备,只需肉眼判读,对操作人员要求低,适合基层医院推广使用,同时能够实现疾病的快速诊断。本研究旨在验证这种快速、简便的新型AQP4抗体检测方法的敏感性及特异性,推进临床应用。方法选取2019年2月-2020年11月福建医科大学附属第一医院中枢炎性脱髓鞘疾病队列中诊断为NMOSD（AQP4抗体阳性）患者及健康对照受试者233例。所有受试者均经过CBA法对AQP4抗体进行检测,选取阳性组100例,阴性对照组100例随机编盲后进行免疫斑点法检测。本临床试验经过福建医科大学附属第一医院伦理委员会伦理审查,并在Clincial Trail注册（NCT04388072）。结果1、盲法通过免疫斑点法进行AQP4抗体检测,100例阳性组中99例免疫斑点法检测为阳性（99%）,1例阴性（1%）,100例阴性对照组中99例免疫斑点法检测为阴性（99%）、1例抗体检测阳性（1%）。与CBA法检测相比,免疫斑点法敏感性99%（95%CI 0.94～1）,特异性99%（95%CI 0.94～1）,阳性似然比99（95%CI 14～696）,阴性似然比0.01（95%CI 0.001～0.71）,ROC曲线AUC=0.99（95%CI 0.97～1）,kappa系数98%（95%CI 0.953～1）,>75%,认为两种检测方法检测效能一致。2、对免疫斑点法抗体检测结果根据颜色深浅评分,采用Spearman检测血清AQP4抗体滴度进行相关性分析（r=0.523,p<0.001）,具有中等强度相关性。结论免疫斑点法在检测AQP4抗体的效能与CBA法具有一致性,是有潜力的向基层医院推广的AQP4抗体检测试剂盒,有望对NMOSD进行快速精准诊断,以尽快开展干预治疗,防止疾病进一步恶化。免疫斑点法试纸条颜色深浅与血清AQP4抗体滴度存在相关性,可预测患者血清AQP4抗体滴度。