人表皮细胞膜片的体外培养及组织结构研究 目的：人表皮细胞膜片体外培养条件的优化，包括细胞消化、分离与收集方法，适宜的细胞接种密度等问题。以获得可供临床移植的人表皮细胞膜片，并进而对其显微及超微结构进行探索。 方法：1 人表皮细胞体外培养种子细胞的分离、培养，采用不同表皮细胞收集方法，并分别在两种不同条件下培养。2 分别以不同密度接种表皮细胞，研究接种密度与融合时间的关系。3 对体外培养的人表皮细胞膜片(HES，human epidermal sheet)进行大体、光镜及电镜观察，免疫组化染色鉴定。 结果：1 确定了DispaseⅡ消化法为较好的表皮细胞分离方法，含10％FCS、含3T3滋养细胞为较好的培养体系。2 较适宜的表皮细胞接种密度为2×10~6／75cm~2flask。3 培养形成的人表皮细胞膜片基本具备临床应用要求。 结论：正常人表皮细胞经DispaseⅡ消化分离收集后，以2×10~6／75cm~2flask密度接种在有3T3滋养层、含10％FCS培养体系中，生长良好，培养7-9天可融合形成人表皮细胞膜片(HES)。外观膜片完整，经组织学检查细胞连接紧密，可自培养瓶中揭下，具一定韧性，可供临床应用。