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第一部分不同浓度七氟醚对胃癌细胞增殖、侵袭及迁移的影响目的:评价不同浓度七氟醚对胃癌SGC7901细胞、AGS细胞及MGC803细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:胃癌SGC7901细胞、AGS细胞及MGC803细胞接种于培养板中培养24h,按照随机数字表法,将胃癌细胞系SGC7901细胞、AGS细胞及MGC803细胞随机分为4组:对照组（C组）、1.7%七氟醚组（S1组）、3.4%七氟醚组（S2组）和5.1%七氟醚组（S3组）。C组细胞通入95%O2-5%CO2混合气体2 L/min,通气时间12 h,S1～3组细胞分别通入1.7%、3.4%和5.1%的七氟醚12h,继续培养24h。分别采用MTT法检测细胞增殖情况,Transwell迁移实验和侵袭实验检测胃癌SGC7901、AGS及MGC803细胞的迁移和侵袭能力。结果:与C组、S1组及S2组比较,S3组SGC7901、AGS、MGC803胃癌细胞的细胞增殖率降低（P＜0.05）。C组、S1～3组胃癌细胞迁移率及侵袭率依次降低（P＜0.05）。小结:1.七氟醚可抑制胃癌SGC7901、AGS、MGC803细胞的侵袭和迁移能力,且效应呈浓度依赖性。2.浓度为5.1%的七氟醚可抑制胃癌胃癌SGC7901、AGS、MGC803细胞的增殖能力。第二部分七氟醚通过影响叉头样转录因子3（FOXP3）的表达调控胃癌细胞的生长和凋亡目的:探讨七氟醚抑制胃癌细胞的迁移、侵袭和凋亡的机制与FOXP3有关。方法:1.应用实时荧光定量聚合酶链反应法和免疫蛋白印迹法检测FOXP3在胃癌胃正常黏膜细胞HEGC和不同分化程度胃癌细胞SGC7901、MKN28、AGS、MKN45 和 MGC803 细胞中的表达。2.观察FOXP3过表达对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭以及凋亡的影响。分别将处于对数生长期的胃癌SGC7901、AGS及MGC803细胞,随机分为2组:FOXP3过表达组和转染对照组。FOXP3过表达组将Lipofectamine 2000脂质体与FOXP3表达质粒（载体-FOXP3）混合物,转染到胃癌细胞;转染对照组将Lipofectamine 2000脂质体与阴性对照空质粒混合物,转染到胃癌细胞。每组随机取3孔,分别采用MTT法检测细胞增殖情况,Transwell迁移实验和侵袭实验检测胃癌SGC7901、AGS及MGC803细胞的迁移和侵袭能力,TUNEL染色法检测胃癌细胞的凋亡情况。3.分析不同浓度七氟醚对胃癌SGC7901、AGS及MGC803细胞中FOXP3的表达的影响:胃癌SGC7901细胞、AGS细胞及MGC803细胞接种于培养板中培养24h,分别将胃癌SGC7901细胞、AGS细胞及MGC803细胞随机分为4组,对照组（C组）、1.7%七氟醚组（S1组）、3.4%七氟醚组（S2组）以及5.1%七氟醚组（S3组）。C组细胞通入混合气体（95%O2-5%CO2）2 L/min,时间 12 h,S1～3组细胞分别通入 1.7%、3.4%和 5.1%的七氟醚12h,继续培养48h。每组随机取3孔,应用qRT-PCR法和Western blotting测定不同浓度七氟醚孵育下FOXP3在胃癌细胞系中的表达。4.胃癌细胞转染靶向FOXP3基因的短发夹RNA（sh-FOXP3）,靶向抑制FOXP3的表达,观察七氟醚对FOXP3表达缺失的胃癌细胞增殖、迁移、侵袭以及凋亡的影响:胃癌SGC7901细胞、AGS细胞及MGC803细胞接种于培养板中培养24h,采用随机数字表法,将胃癌SGC7901细胞、AGS细胞及MGC803细胞随机分为3组,对照组、七氟醚组和七氟醚+sh-FOXP3组。每组随机取3孔,分别采用Transwell迁移实验和侵袭实验分别检测胃癌SGC7901、AGS及MGC803细胞的迁移能力,TUNEL染色法检测胃癌细胞的凋亡情况。结果:1.qRT-PCR检测胃正常黏膜细胞HEGC和不同分化程度胃癌细胞SGC7901、MKN28、AGS、MKN45 和 MGC803 细胞在转录水平中 FOXP3的表达,与正常胃黏膜细胞比较,SGC7901、AGS和MGC803细胞FOXP3 mRNA的表达下调（P＜0.05）。Westernblotting结果显示,与正常胃黏膜细胞比较,SGC7901、AGS和MGC803细胞FOXP3蛋白表达下调（P＜0.05）。2.与质粒转染对照组比较,FOXP3过表达组在转染FOXP3质粒后,FOXP3蛋白表达上调;转染FOXP3质粒稳定后48、72h时,胃癌细胞SGC7901、AGS和MGC803细胞增殖率、迁移率、侵袭率降低,凋亡率增加（P＜0.05）。3.不同浓度七氟醚对胃癌细胞SGC7901、AGS和MGC803细胞FOXP3蛋白表达的影响:与C组比较,S1～3组胃癌细胞FOXP3蛋白表达上调;与S1组比较,S2、S3组胃癌细胞FOXP3蛋白表达上调;与S2组比较,S3组胃癌细胞FOXP3蛋白表达上调（P＜0.05）。4.靶向抑制FOXP3的表达后,七氟醚对胃癌细胞SGC7901、AGS和MGC803细胞侵袭、迁移和凋亡的影响:与对照组比较,七氟醚组、七氟醚+sh-FOXP3组胃癌细胞SGC7901、AGS和MGC803细胞迁移率、侵袭率降低,凋亡率升高（P＜0.05）;与七氟醚组比较,七氟醚+sh-FOXP3组胃癌细胞SGC7901、AGS和MGC803细胞迁移率、侵袭率升高,细胞凋亡率降低（P＜0.05）。小结:七氟醚抑制胃癌细胞迁移和侵袭的机制,可能与上调FOXP3的表达有关。第三部分七氟醚对胃癌根治术患者CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞的影响目的:评价七氟醚对进展期胃癌患者外周血CD4+CD25+FOXP3+的影响。方法:选择择期全麻下行胃癌根治术的进展期胃癌患者40例,ASA分级Ⅰ或Ⅱ级,年龄18～75岁,BMI 20～30kg/m2,影像学分期为T2～T4NxM0,预期手术时间≥ 2小时,未行新辅助化疗或放疗,无严重心脏、肺脏、肾脏以及肝脏功能障碍。由Excel生成随机数字表,按照随机数字表法随机分为2组（n=20）:七氟醚组（S组）和全凭静脉组（T组）。S组吸入0.7～1.0MAC七氟醚、恒速泵注瑞芬太尼0.05～0.1μg/（kg·min）维持麻醉,T组TCI丙泊酚（Ce 1～3μg/ml）、恒速泵注瑞芬太尼0.05～0.1μg/（kg·min）维持麻醉,两组维持BIS值在45～60,SPI值在20～50。根据情况追加顺阿曲库铵。术中根据PPV指导液体输注。手术结束前10min,静脉给予地佐辛注射液5mg,盐酸帕洛诺司琼0.25mg,术毕行双侧腹直肌鞘阻滞,并连接术后病人自控镇痛泵（PCIA）。术后维持VAS评分≤3分。记录患者性别、年龄、身高、体重、ASA分级及术前的合并症情况;记录手术方式、麻醉时间、手术时间;记录术中低血压、高血压等不良事件发生情况、记录术后24、48hVAS评分;记录患者术后肿瘤组织学类型、病理分期;分别于麻醉诱导前（T1）、术毕（T2）及术后第1天（T3）抽取外周血3ml,测定CD4+CD25+FOXP3+T细胞水平。结果:1.与S组比较,T组患者T2、T3时外周血CD4+CD25+FOXP3+T细胞所占比例升高（P＜0.05）。2.与ⅡB期比较,两组ⅢA、ⅢB期患者外周血CD4+CD25+FOXP3+T细胞所占比例升高（P＜0.05）。3.与T1时比较,两组ⅡB期患者T2、T3时外周血CD4+CD25+FOXP3+T细胞所占比例降低（P＜0.05）。4.S 组ⅢA、ⅢB 期患者 T2、T3 时外周血 CD4+CD25+FOXP3+T 细胞所占比例降低、T组ⅢA、ⅢB期患者T2时外周血CD4+CD25+FOXP3+T细胞所占比例升高（P＜0.05）。5.与T2时比较,两组ⅡB、ⅢA、ⅢB期患者T3时外周血CD4+CD25+FOXP3+T细胞所占比例降低（P＜0.05）。小结:七氟醚可减轻进展期胃癌患者的肿瘤免疫抑制作用。第四部分七氟醚对进展期胃癌患者术后早期复发或转移的影响目的:观察七氟醚对进展期胃癌患者术后复发或转移的影响,并对影响胃癌患者术后复发或转移的危险因素进行分析。方法:选择择期全麻下行胃癌根治术的进展期胃癌患者171例,ASA分级Ⅰ或Ⅱ级,年龄18～75岁,BMI 20～30kg/m2,影像学分期为T2～T4NxM0,预期手术时间≥ 2 h,无心律失常、无严重心脏、肺脏、肾脏和肝脏功能疾病。常规麻醉诱导后行双侧腹直肌鞘阻滞。麻醉维持:吸入0.7～1.0MAC七氟醚或TCI丙泊酚（Ce 1～3μg/ml）,恒速泵注瑞芬太尼0.05～0.1μg/（kg·min）维持麻醉,BIS值维持在45～60。术中根据情况,间断静脉给予肌肉松弛剂顺阿曲库铵0.05mg/kg。术中采取目标导向液体治疗,依据PPV指导液体输注。手术结束前10min,静脉依次注射地佐辛注射液5mg、盐酸帕洛诺司琼0.25mg,术毕连接PCIA。术后维持VAS评分＜3分。根据患者术后2年内是否存在肿瘤复发转移,将患者分为2组:复发组和无复发组。记录两组患者性别、年龄、体重、身高、ASA分级、术前合并症以及新辅助化疗或新辅助放疗的情况;记录手术切除范围、手术时间、麻醉时间;记录术中低血压、高血压等不良事件发生情况;记录术后肿瘤组织学类型、病理分期以及术后肺部并发症的发生情况。结果:1.有77例进展期胃癌患者于术后2年内发生了复发转移,复发率45.0%。复发组中有52例采用七氟醚维持麻醉,占复发人数的67.5%;无复发组有71例采用七氟醚维持麻醉,占未复发人数的74.0%。复发组和无复发组间进行比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。2.Kaplan-Meier曲线显示,应用七氟醚维持麻醉的患者,中位复发时间为26（22-30）月,丙泊酚维持麻醉的患者,中位复发时间为25（22-28）月,两种麻醉药物对进展期胃癌患者术后复发转移的影响没有统计学差异（χ2=0.076,Log Rank P=0.783）。3.多因素COX回归分析显示,年龄、术中低血压、病理N分期、有脉管瘤栓以及肿瘤组织学分型,是进展期胃癌患者术后2年内复发的影响因素（P＜0.05）。结论:1.七氟醚不会增加胃癌根治术后早期复发的风险。2.术中低血压、病理N分期、组织学分型为低分化癌、有脉管瘤栓是进展期胃癌患者术后早期复发的独立危险因素。