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目的： 探讨NOD8(也称为PYNOD)对H2O2诱导人肝细胞凋亡和损伤的影响及机制研究。 方法： 体外培养人肝细胞株 L02，pEGFP-C2空质粒及 pEGFP-NOD8重组质粒分别经JetPRIME介导转染L02细胞；用H2O2诱导细胞凋亡。实验分为3组：pEGFP-C2组（对照组），pEGFP-C2+H2O2组，pEGFP-NOD8+H2O2组。采用MTT检测细胞活性，Hoechst33342染色及流式细胞术检测细胞凋亡，比色法及荧光法分别检测细胞caspase-3、caspase-8和caspase-9活性，Western blotting检测NOD8、Fas、Bax、Bcl-2及胞浆Cyt-C蛋白表达，乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒检测细胞分泌的LDH活性，用荧光酶标仪检测细胞内活性氧（ROS）的水平。 结果: （1）pEGFP-NOD8质粒转染组NOD8蛋白表达显著高于pEGFP-C2空质粒转染组；（2） pEGFP-C2+H2O2组细胞活性明显低于pEGFP-C2组，而pEGFP-NOD8+H2O2组细胞活性显著高于pEGFP-C2+H2O2组；（3）Hoechst33342染色法观察发现，与pEGFP-C2组相比，pEGFP-C2+H2O2组有较多细胞出现强蓝色荧光细胞核，细胞凋亡较多，pEGFP-NOD8+H2O2组细胞凋亡则明显减少；流式细胞仪分析显示，pEGFP-C2+H2O2组细胞凋亡率明显高于pEGFP-C2组，而pEGFP-NOD8+H2O2组细胞凋亡率显著低于pEGFP-C2+H2O2组；（4） pEGFP-C2+H2O2组细胞caspase-3、8、9活性明显高于pEGFP-C2组，而pEGFP-NOD8+H2O2组细胞caspase-3、8、9活性与pEGFP-C2+H2O2组比较显著下降；（5）与pEGFP-C2组比较，pEGFP-C2+H2O2组细胞的Fas、Bax蛋白和胞浆Cyt-C蛋白表达明显增高，Bcl-2蛋白表达明显降低，而pEGFP-NOD8+H2O2组Fas、Bax蛋白和胞浆Cyt-C蛋白表达显著低于pEGFP-C2+H2O2组，Bcl-2蛋白表达则明显高于pEGFP-C2+H2O2组；（6）pEGFP-C2+H2O2组细胞LDH释放量与pEGFP-C2组相比明显升高，而pEGFP-NOD8+H2O2组LDH的释放量与pEGFP-C2+H2O2组比较则显著下降；（7）与pEGFP-C2组相比较，pEGFP-C2+H2O2组细胞内ROS的水平则明显升高，而pEGFP-NOD8+H2O2组细胞内ROS的水平则显著低于pEGFP-C2+H2O2组。 组细胞LDH释放量与pEGFP-C2组相比明显升高，而pEGFP-NOD8+H2O2组LDH的释放量与pEGFP-C2+H2O2组比较则显著下降；（7）与pEGFP-C2组相比较，pEGFP-C2+H2O2组细胞内ROS的水平则明显升高，而pEGFP-NOD8+H2O2组细胞内ROS的水平则显著低于pEGFP-C2+H2O2组。 结论: (1)过表达NOD8明显改善H2O2诱导的L02细胞活性降低，并抑制capsase-3的活性及细胞凋亡； (2)过表达NOD8可抑制H2O2诱导的caspase-9活性，下调Bax、胞浆Cyt-C蛋白的表达，上调Bcl-2蛋白的表达，从而抑制内源性凋亡途径； (3)过表达NOD8可抑制H2O2诱导的caspase-8活性，下调Fas蛋白表达，从而抑制外源性凋亡途径； (4)过表达NOD8可抑制H2O2诱导的LDH释放和细胞内ROS水平。 综上所述，NOD8可改善H2O2诱导的细胞活性降低，并抑制细胞凋亡和LDH释放。此外，NOD8可抑制caspase-8和caspase-9、caspase-3活性，下调Fas、Bax和胞浆Cyt-C蛋白表达，上调Bcl-2蛋白表达，通过内、外源性凋亡途径抑制H2O2诱导的L02细胞凋亡；并且NOD8可抑制H2O2诱导的细胞内ROS的水平，说明过表达NOD8可通过抑制细胞内ROS产生发挥抗凋亡和损伤作用。