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目的：
1、利用LPS复制急性肺损伤大鼠模型；
2、探讨20％Intralipid、20％Clinoleic和10％Omegaven3种脂肪乳剂对急性肺损伤大鼠炎症介质:PGE2、LTB4的干预作用；
3、探讨3种脂肪乳剂对急性肺损伤大鼠肺泡上皮细胞凋亡的影响；
4、探讨3种脂肪乳剂对肝功能的影响。
方法：
1、模型和分组幼年Sprague-Dawley大鼠100只随机分为五组,每组20只,分别为Intra组、Clino组、Omega组、LPS组和空白组。处理方法:五组分别通过尾静脉连续7天注射20％Intralipid、20％Clinoleic、10％Omegaven、0.9％NaCl和0.9％NaCl,剂量为30ml/Kg。第7天取标本,在取标本前8小时,空白组气管内滴入生理盐水0.25ml/kg,其余四组均滴入LPS(0.5mg/Kg,浓度为2mg/ml)。
2、指标检测每天记录SD大鼠的存活数,体重,精神、行为状态。在第7天(模型完成后8小时)用10％水合氯醛(3.4ml/kg)经腹腔注射麻醉大鼠,留取血标本(3-5ml),置管,离心,留取上清液用于检测PGE2和LTB4蛋白含量及生化检测。留取肝组织、肺组织,记录重量。肝、肺离体后,4％甲醛液保存,石蜡包埋、切片,常规苏木素伊红(HE)染色,在光镜下观察各组大鼠肝、肺组织的病理改变,并用脱氧核糖核酸转移酶介导的细胞凋亡标记技术(TUNEL)原位检测其细胞凋亡(CA)并计算凋亡指数(AI)。
结果:
1、肝、肺指数:肝指数:Intra组(4.476％±0.277％),Clino组(4.486％±0.219％),Omega组(4.227％±0.126％),LPS组(4.496％±0.292％),Blank组(5.667％±0.246％)；肺指数:Intra组(0.616％±0.096％),Clino组(0.634％±0.085％),Omega组(0.603％±0.065％),LPS组(0.685％±0.093％),Blank组(0.510％±0.054％)。与blank组相比,Intra组、Clino组、Omega组和LPS组的肝指数明显降低(P<0.01)；余四组间两两比较无统计学意义。与blank组相比,Intra组、Clino组、Omega组的肺系数明显增高(P<0.05),LPS组明显增高(P<0.01)；但余四组间两两比较无统计学意义。
2、ELISA检测结果:各组血清LTB4:Intra组(333.888±10.901)pg/ml、Clino组(372.905±14.840)pg/ml、Omega组(383.758±3.629)pg/ml、LPS组(392.152±8.412)pg/ml、blank组(272.983±16.661)pg/ml；各组血清PGE2:Intra组(52.091±4.155)pg/ml、Clino组(27.630±6.262)pg/ml、Omega组(24.613±4.672)pg/ml、LPS组(139.241±23.432)og/ml、blank组(15.523±4.655)pg/ml。与blank组相比,四组LTB4水平均显著升高(P<0.01)；与Intra组比,Omega组、Clino组LTB4水平显著增高(P<0.05)；与LPS组相比较,Intra组在LTB4水平有显著降低(P<0.01)。与blank组相比,Intra组PGE2水平有显著增高(P<0.05),Clino、Omega两组增高无统计学意义；与Intra组相比,Omega组PGE2水平显著降低(P<0.05),Clino组有降低但没有统计学意义。与LPS组相比,Clino组、Omega组PGE2水平显著降低(P<0.05),Intra组降低没有统计学意义。
3.HE染色结果:空白组肝组织结构、细胞未见明显异常。余四组表现为轻度非特异性炎症改变:肝细胞弥漫混浊肿胀,部分气球样变,肝细胞轻度水样变性,少量淋巴细胞浸润,偶可见到点灶状肝细胞坏死。空白组肺组织无明显的炎症表现；LPS组、Intra组、Clino组和Omega组大鼠肺组织病理改变明显,可见明显炎症细胞浸润、出血。
4、肺组织细胞凋亡结果:Intra组(18.180％±3.046％)、Clino组(12.756％±3.917％)、Omega组(11.767％±3.219％)、LPS组(19.748％±4.935％)、blank组(2.140％±0.952％)。与blank组相比,各组AI均显著升高(P<0.01)；与LPS组相比,Cloino组和Omega组AI显著降低(P<0.01),Clino组和Omega组差异无显著性。
5、血生化结果:各组ALT、AST、TBil值:Intra(110.286±17.903 U/L、470.429±62.596 U/L、1.171±0.176 umol/L),Clino组(104.00±17.580 U/L、399.750±57.571 U/L、0.975±0.448 umol/L),Omega组(77.000±14.534 U/L、256.429±40.137 U/L、0.542±0.331 umol/L),LPS组(92.013±19.763 U/L、390.500±48.032 U/L、1.238±0.261 umol/L),Blank组(45.105±5.402 U/L、149.429±26.940 U/L、1.114±0.134 umol/L)。ALT统计结果:与blank组相比,LPS组和Clino组显著升高(P<0.05),Intra组显著升高(P<0.01)；与LPS组相比,blank组显著降低(P<0.05)；三脂肪乳剂组之间两两比较差异无统计学意义。AST统计结果:与blank组相比,LPS组、Clino组和Intra组均显著升高(P<0.01)；与LPS组相比,blank组显著降低(P<0.01)；与Intra相比,Omega组显著降低(P<0.01)。TBil统计结果:五组的TBil两两比较差异均无统计学意义。
结论:
1、20％Clinoleic和10％Omegaven均能减轻由LPS所致的肺部急性炎症反应,并可能通过LTB4、PGE2达免疫调节作用。
2、从肺泡上皮细胞凋亡指数可知20％Clinoleic和10％Omegaven能减少上皮细胞凋亡。
3、3种脂肪乳剂本身不能导致肝功能损伤,但20％Lipoven和20％Clinoleic具有协同加重ALI所致的肝功能损伤,10％Omegaven能减轻这种肝功能损伤。