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目的:本试验通过体外培养大鼠小肠上皮细胞（IEC）,建立黄嘌呤氧化酶/黄嘌呤（XO/X）和过氧化氢（H2O2）对IEC氧化损伤模型,研究不同氧自由基对小肠上皮细胞损伤与功能的关系,以及硫辛酸（LA）对XO/X与H2O2氧化胁迫下IEC的干预作用。方法:实验一:对原代培养大鼠IEC的分离方法做出改进与简化:联合运用300 U/mL胶原酶Ⅺ和100 mg/ml中性蛋白酶I分离新生大鼠小肠,可得到完整隐窝单位和少数单个小肠上皮细胞,在5%FBS-DMEM/F12生长培养基中,3-4d形成细胞集落,7-8d细胞汇合需要传代,用0.05% Trypsin-EDTA消化细胞,传代后细胞增殖能力较强,运用刮除法和相差消化相差贴壁法进行纯化,经免疫组化法鉴定能够得到纯度80%以上的小肠上皮细胞,为研究营养素对肠上皮细胞的作用提供了理想的体外模型。实验二:XO/X与H2O2损伤IEC模型的建立:以不同浓度的XO/X（ 5、10、50、100、200U/L XO和10μmol/L X）和不同浓度的H2O2 （0.1μmol/L、1μmol/L、2.5μmol/L、10μmol/L、30μmol/L、100μmol/L和1mmol/LH2O2）,分别作用IEC细胞3、12、24、48h,以四唑盐（MTT）比色法检测细胞活力氧化,确定XO/X和H2O2损伤模型适宜损伤浓度和损伤时间。实验三:XO/X和H2O2氧化胁迫模型下大鼠IEC损伤与修复及LA的干预作用:XO/X模型下,空白对照组:细胞正常培养24h; XO/X损伤组:细胞中加入50U/L XO,10μmol/L X后,培养24 h; XO/X+LA药物组:细胞与不同浓度的LA（0.lμg/ml、1μg/ml和10μg/ml）预孵3 h,再加入50U/L XO培养24h。H2O2模型下:空白对照组:细胞正常培养24h; H2O2损伤组:加入100μmol/L H2O2后,培养24 h; H2O2+LA药物组:细胞与不同浓度的LA（0.lμg/ml、1μg/ml和10μg/ml）预孵3 h,再加入100μmol/L H2O2培养24 h,分别测定LA对各组细胞活力,IEC抗氧化指标（SOD、GSH-pX和MDA）、功能酶（脂肪酶、淀粉酶）、肠道损伤特异性指标（DAO和LDH）的影响。结果:1. XO/X损伤IEC模型的适宜浓度为50U/L XO和10μmol/L X,适宜培养时间为24h; H2O2损伤IEC模型的适宜浓度为100μmol/ml H2O2,适宜培养时间为24h。2. XO/X（50U/L XO/10μmol/L X）与H2O2（100μmol/ml）氧化胁迫下的IEC,细胞活力显著下降（P<0.05）,IEC的SOD、GSH-pX、脂肪酶、淀粉酶、二胺氧化酶活性显著下降（P<0.05）,细胞培养液中MDA含量显著上升（P<0.05）;且50U/L XO对IEC造成的氧化损伤相较100umol/ml的H2O2严重。3. LA可以促进IEC的增殖,显著提高XO/X与H2O2两种模型氧化胁迫下IEC的SOD、GSH-pX活性,降低细胞培养液中MDA的含量（P<0.05）;同时LA提高了氧化胁迫下IEC分泌的淀粉酶（P<0.05）和脂肪酶（P>0.05）的活性;显著降低了氧化胁迫下IEC培养液中LDH的活性,提高了IEC裂解液和培养液中DAO的活性。