【摘 要】
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软骨藻酸(domoic acid,DA)是由海洋硅藻产生的一种兴奋性神经毒素,它可在鱼贝类中富集,且常常伴随着赤潮的发生,人类摄入后能够引起记忆缺失性中毒(amnesic shellfish poisoning,ASP),故又称记忆缺失性贝类毒素。鱼类可以通过摄食藻细胞或累积藻毒素的浮游动物在一些组织器官如肝脏、胃、鳃中富集DA。随着有毒藻类赤潮发生越来越频繁,DA不仅威胁着渔业和水产业,也危害着
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软骨藻酸(domoic acid,DA)是由海洋硅藻产生的一种兴奋性神经毒素,它可在鱼贝类中富集,且常常伴随着赤潮的发生,人类摄入后能够引起记忆缺失性中毒(amnesic shellfish poisoning,ASP),故又称记忆缺失性贝类毒素。鱼类可以通过摄食藻细胞或累积藻毒素的浮游动物在一些组织器官如肝脏、胃、鳃中富集DA。随着有毒藻类赤潮发生越来越频繁,DA不仅威胁着渔业和水产业,也危害着海洋动物和人类的安全,使它在经济及生态方面的重要性日益突出。尽管一些研究已对DA在双壳类动物中的积累和净化有一定的研究,但是关于DA在鱼类中的代谢机制研究得很少。本研究成功克隆了黄斑篮子鱼(Siganus oramin)肝脏第Ⅰ时相去毒酶细胞色素P450 1A(CYPlA),第Ⅱ时相去毒酶谷胱甘肽S-转移酶alpha(GSTA)和谷胱甘肽S-转移酶rho(GS7R),热休克蛋白70(HSP70),钠钾ATP酶alpha 1(ATP1A1)和β-肌动蛋白(ACT)基因的核心序列,它们分别长900 bp,582 bp,615 bp,660 bp,749 bp和554 bp。我们给处理组篮子鱼注射DA(2μg/g湿体重),对照组篮子鱼注射磷酸缓冲液。24小时后提取篮子鱼肝脏总RNA。我们用半定量PCR的方法,并用β-肌动蛋白作为外参照,在其指数期增长的范围内得到CYP1A,GSTA,GSTR,HSP70和ATP1A1 mRNA与β-肌动蛋白mRNA(%)的比值。结果显示篮子鱼的第Ⅰ时相去毒酶CYP1A基因表达在注射DA后被显著地诱导(P<0.05),而HSP70基因表达在注射毒素后有上升趋势,尽管没有显著性变化(P>0.05)。篮子鱼GSTA,GSTR和ATP1A1基因表达在注射DA后没有显著性变化。由CYP1A基因表达的显著诱导可以看出,第1时相去毒酶CYP1A在鱼类DA代谢中起了重要的作用。本实验首次从分子水平上研究了记忆缺失性毒素DA在海洋鱼类中积累的分子机制。我们认为第Ⅰ时相去毒酶CYP1A是DA代谢的关键的酶,它可通过生物转化降低DA的毒性,而第Ⅱ时相去毒酶GST在DA代谢过程中的作用不显著,使毒素不能被有效地排出体外。因此,我们认为DA在海洋鱼类中积累,可能与DA处理后只有第Ⅰ时相去毒酶CYP1A(解毒作用)的诱导表达而没有第Ⅱ时相去毒酶GST(排毒作用)的诱导表达有关。
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