槐角是一种传统中药,具有清热凉血等作用。槐角中富含异黄酮类化合物,其中槐角苷的含量最高,且药用活性很强,能有效防治癌症、骨质疏松症、妇女绝经症等病症,已被《中华人民共和国药典》(2005)确定为槐角质量监控和药品标准制定的重要考量依据,在天然产物领域一直受到较大的关注。槐角总异黄酮经过水解可生成染料木黄酮。染料木黄酮同样是一种高活性异黄酮类物质,它具有抗氧化、抗炎、抑菌、抗癌、抗心血管疾病等多种作用。因此研究槐角异黄酮的提取、纯化分离、水解,生产制备槐角苷和染料木黄酮,对于相关医药的开发应用具有重要意义。本研究采用加压溶剂法提取槐角总异黄酮的工艺方法,利用正交试验优化出其工艺参数为：提取时间5mmin、提取温度110℃、提取压力1300kPa、液固比12.5mL/g、乙醇体积分数50%。在此条件下槐角总异黄酮得率最大,为28.4%。加压溶剂法与微波辅助法、超声提取法和亚临界水法相比,更加短时高效；反应过程中充入高纯氮气进行保护,有效防止反应产物发生氧化；同时其以水和醇为提取溶剂,符合中药现代化发展的绿色、节能、环保的理念,是一种理想的提取中药材有效成分的方法。研究了溶剂萃取法对槐角异黄酮粗提液的初步纯化效果。在相比(水：有机溶剂)为1：2的条件下,依次利用乙醚(1次)、乙酸乙酯(1次)、正丁醇(3次)进行萃取,终产物萃取率为94.1%,纯度为52.4%。经过初步纯化,不仅产物纯度相比粗提物纯度(19.5%)有大幅提高,且一定程度上富集了糖苷型异黄酮。利用高速逆流色谱对槐角总异黄酮进行分离,得到了高纯度槐角苷。通过试验,确定了溶剂体系为：正己烷-正丁醇-甲醇-水(2：3.8：1.2：4)及HSCCC分离操作参数：主机转速为900r/mmin,流动相流速2mL/min,分离温度25℃,样品浓度10mg/mL。在此条件下对槐角总异黄酮进行分离,整个过程仅耗时5个小时,分离得到了高纯度的槐角苷,分离度高,峰形良好。证明高速逆流色谱法是一种极为有效的天然植物异黄酮分离方法。利用盐酸甲醇溶液对槐角总异黄酮进行水解,生产染料木黄酮。以水解率为指标,在单因素试验的基础上,利用响应曲面法中的Box-Behnken设计对水解工艺进行了优化,建立了槐角异黄酮的水解率与3个影响因素的二次多项式回归模型。该模型高度显著,拟合度良好。借助Design ExpertV8.0.6软件对模型方程进行分析,得出优化的酸水解条件为：水解时间3.8h、盐酸浓度2.59mol/mL、水解温度78.5℃。在此条件下得到槐角总异黄酮的水解率为93.38%。证明盐酸法是一种较为有效的槐角异黄酮水解方法。利用‘"Amano"β-糖苷酶对槐角总异黄酮进行水解,生产染料木黄酮。在单因素试验的基础上,利用响应曲面法中的Box-Behnken设计对水解工艺进行了优化,建立了槐角异黄酮的水解率与四个影响因素的二次多项式回归模型。该模型高度显著,拟合度良好。借助Design ExpertV8.0.6软件对模型方程进行分析,得出优化的酶水解条件为：酶浓度0.5mg/mL、水解时间3.68h、pH4.95、水解温度59.2℃。在此条件下得到槐角总异黄酮的水解率为95.76%,证明"Amano"β-糖苷酶是一种十分有效的槐角异黄酮水解酶。与酸水解相比,"Amano"β-糖苷酶水解槐角异黄酮不仅水解效果良好,而且副产物少,产物纯度高,绿色环保,更加值得工业推广。利用α-脱氧核醣法和邻苯三酚自氧化法测定了染料木黄酮、染料木苷及槐角苷清除羟自由基和超氧自由基的能力。试验证明三种异黄酮均具有一定的清除活性,清除能力的大小与不同异黄酮的结构、处理浓度以及不同自由基类型密切相关。同一浓度下,三种异黄酮清除两种自由基能力的大小顺序为：染料木黄酮>染料木苷>槐角苷。