C1QB在原发性宫颈癌中的表达及潜在分子机制研究

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:z245713805
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背景和目的:宫颈癌(Cervical cancer,CC)是全球女性生殖道常见的恶性肿瘤。随着子宫颈脱落细胞学检查及宫颈疫苗的推广和普及,使得许多癌前病变和早期癌得以发现,宫颈癌5年生存率和治愈率显著提高,但发病率和死亡率仍较高,并且有年轻化的趋势。近年来,C1q在癌症调控中的作用日益受到关注。越来越多的研究证实,C1q作为经典补体途径的激活因子,不仅与自身免疫性疾病和炎症性疾病有关外,也与肿瘤形成的病理生理有关。C1q在各种人类肿瘤的微环境中表达,对肿瘤的进展起到保护或抑制的作用。C1QB是C1q三种组成链中的核心启动子。研究表明,C1QB在肾癌、黑色素瘤、胃癌、胶质瘤中上调,在前列腺癌和鼻咽癌中下调,与正常组织有显著差异性表达,并与肾癌临床分期,胃癌、食管癌预后相关。而C1QB在宫颈癌中的表达和生物学作用仍是未知数,因此需要进一步深入探究C1QB在宫颈癌中的作用及分子机制,为宫颈癌病情进展、预后评估及临床治疗提供方向和依据,为以补体C1q为靶点的治疗方法及药物研发工作提供线索。方法:1、据本研究纳入标准,收集广西医科大学附属肿瘤医院2018年1月~2020年12月期间本院已确诊的浸润性宫颈癌80例为实验组,高级别鳞状上皮内病变(HSIL)20例、低级别鳞状上皮内病变(LSIL)20例及正常宫颈上皮组织20例设为对照组。通过免疫组织化学染色方法,检测C1QB蛋白在浸润性宫颈癌、HSIL、LSIL及正常宫颈组织中的表达,同时探讨在浸润性宫颈癌中,C1QB蛋白与P16蛋白、Ki67蛋白及P53蛋白之间的关系。免疫组织化学结果采用半定量方法进行评分,分为阴性(-)、弱阳性(+)、中等阳性(++)及强阳性(+++)四个等级。使用SPSS24.0软件,进行χ~2卡方检验数据统计、单因素方差法(ANOVA)数值型变量比较分析及Spearman相关分析等统计方法。2、通过Oncomine数据库及GEPIA在线数据库对C1QB进行计算病理学分析,探索C1QB基因在宫颈癌组织中的m RNA和DNA表达及其相关蛋白,并进一步探讨C1QB与宫颈癌临床病理参数的相关性。此外,采用GO和KEGG分析C1QB在宫颈癌中的主要功能和分子通路。结果:1、临床实验病理学结果:(1)C1QB蛋白在各组中的表达并不相同,免疫组化染色结果显示:浸润性宫颈癌组80例,阴性(-)13例,弱阳性(+)31例,中等阳性(++)36例,强阳性(+++)为0例,阳性率为83.8%;HSIL组20例,阴性(-)7例,弱阳性(+)6例,中等阳性(++)7例,强阳性(+++)为0例,阳性率为65%;LSIL组20例:阴性(-)17例,弱阳性(+)3例,中等阳性(++)0例,强阳性(+++)为0例,阳性率为15%;正常组:阴性(-)18例,弱阳性(+)2例,中等阳性(++)0例,强阳性(+++)为0例,阳性率为10%。(2)通过卡方检验对各组之间进行差异性分析,在HSIL组与正常组之间、浸润性宫颈癌组与正常组之间、HSIL组与LSIL组之间、浸润性宫颈癌组与LSIL组之间的差异具有统计学意义(P<0.05);而在LSIL组与正常组之间、浸润性宫颈癌组与HSIL组之间并无显著差异性。(2)经单因素方差法分析及卡方检验分析,在浸润性宫颈癌中,肿物越大,浸润深度越多,并存在癌栓,C1QB蛋白表达越强,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)C1QB蛋白表达在腺癌、鳞癌、腺鳞癌不同组织学类型中亦存在差异性表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)C1QB蛋白在浸润性宫颈癌的表达与P16蛋白、Ki67蛋白的表达具有正相关性,与P53蛋白无相关性。2、计算病理学结果:(1)C1QB在宫颈鳞状细胞癌组织中m RNA和DNA表达显著高于正常宫颈上皮组织,P<0.05。(2)C1QB在宫颈癌组织m RNA表达水平与临床分期及生存率无相关性。(3)宫颈癌组织中基因差异性表达谱中前10位的基因为:MELK、CKS1B、PPM1A、KLHDC7B、PTGES3、USP9X、EFNA1、WARS、HIST1H2BM、PARN。(4)C1QB相关性最较高的10个基因为:C1QA、TYROBP、LAPTM5、ITGB2、FCERIG、SLAMF8、CSF1R、C3AR1、IL15RA、MS4A6A。(5)GO及KEGG富集通路分析显示:C1QB可能通过细胞因子-细胞因子受体相互作用、Toll样受体信号通路、病毒蛋白与细胞因子及细胞因子受体的相互作用、补体和凝血级联等多个通路调控肿瘤的进展,并参与了免疫系统过程的调节等生物学过程。结论:C1QB可能促进了宫颈癌的发生发展。C1QB在宫颈癌中与诸多相关性蛋白共同作用,通过参与多个分子信号通路发挥了复杂的功能,从而影响了肿瘤发生发展。
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