药物蛋白结合是药物体内过程的重要组成部分，能显著影响药物在体内的分布、作用强度与作用持续时间、分布容积与半衰期等。质谱滴定法已较广泛地用于蛋白非共价结合体系研究，其依据的主要假定条件是“游离蛋白与结合蛋白在气相时的质谱离子强度与在液相时的摩尔浓度成正比，且比例常数近似相等”，这一假定在很多情况下是不成立的。本论文提出了一种应用质谱滴定法研究药物与血浆蛋白相互作用的新质谱滴定法，该方法的主要假定条件是：当蛋白与小分子配体间有一定亲合力、且作用配体的摩尔量大于作用蛋白的摩尔量时，蛋白复合物总浓度与作用蛋白总浓度近似相等。 本论文以三种蛋白质分子(人血清蛋白、α<,1>-酸性糖蛋白和牛血清白蛋白)与两种药物小分子(小檗碱、射干甙)为研究对象，通过不同浓度的药物与固定浓度的蛋白的电喷雾离子化离子阱质谱(ESI-MS)滴定实验，分析了各药物与蛋白形成复合物的最大表观结合化学计量比；通过Scatchard方程线性拟合，计算了各药物与蛋白的结合位点数和复合物结合常数K；根据作用温度变化对复合物热力学参数△H、△S变化的影响，分析了各复合物间的作用力类型；同时应用荧光淬灭法实验结果对上述ESI-MS滴定法实验结果进行验证。本论文的主要实验结果如下： 1) 小檗碱与α<,1>-酸性糖蛋白在37℃形成复合物的结合常数K和结合位点数n分别为1.933×10<5> L·mol<-1> 和n=6.7，27℃结合常数K为1.713×10<5> L·mol<-1>，二者之间的作用力主要为疏水作用力，与应用荧光淬灭法研究结果基本一致。 2) 小檗碱与人血清白蛋白在37℃形成复合物的结合常数K和结合位点数 n分别为 1.29×10<5> L·mol<-1> 和n=5.1，二者间的作用力主要为疏水作用力，与应用紫外光谱和荧光淬灭法研究的结果基本一致。 3) 小檗碱与牛血清白蛋白在37℃形成复合物的结合常数K和结合位点数n分别为8.97×10<4>L·mol<-1> 和 n=3.2，与应用荧光淬灭法研究的结果基本一致。 4)射干甙与人血清白蛋白和α<,1>-酸性糖蛋白在37℃形成复合物的稳定常数K和结合位点数n分别为1.914×10<4> L·mol<-1>，n=7.8和5.893×10<4>L·mol<-1>，n=3.3，作用力都主要为静电引力。 上述实验结果初步表明，本论文提出的质谱滴定法新假定条件在分析蛋白非共价结合体系时具有一定实用性与可行性。