夹脊电针对全横断脊髓损伤大鼠Rac1蛋白表达的影响

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nhhwhm
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目的:本研究试图构建全横断大鼠脊髓损伤模型,探索夹脊电针干预对脊髓损伤大鼠Rac1蛋白表达变化及规律、观察损伤区组织病理形态学改变及治疗前后运动功能的改善情况,进而探讨夹脊电针治疗大鼠脊髓损伤的作用机制,为临床治疗提供可靠的实验依据。方法:首先选定SD成年雌性大鼠,共81只,依据随机抽样的数字表方法对大鼠进行不同组类的划分,分为假手术组、模型组以及夹脊电针组,各组大鼠数目对等。其次,进行全横断式脊髓损伤大鼠模型的制作,假手术组将大鼠麻醉后,切开其背部皮肤肌肉组织、咬合椎板,令T10节段脊髓暴露,不予横断,之后缝合切开的伤口,术后仅给予常规护理;夹脊电针组和模型组均在T10水平节段上横断脊髓,模型制备成功后,模型组不作治疗,仅给予术后常规护理;夹脊电针组则需要术后2h开展夹脊电针治疗,时间为30min,之后每日治疗一次,每次30min。假手术组、模型组大鼠每日抓取1次,在术后3d、7d、14d采用BBB评分评估各组大鼠的运动功能情况,随后分别取出各组大鼠脊髓损伤区的脊髓损伤组织,采用Western Blot法依次测定各组大鼠的Rac1蛋白表达情况、通过HE染色法探究大鼠脊髓组织病理形态变化。结果:1.BBB评分:假手术组各时间点的BBB评分皆为21分;对比来看,其余两组三个时间点的BBB评分出现下降(P<0.05),其中模型组下降最为明显;较之模型组而言,夹脊电针组在经治疗后,三个时间点的BBB评分均提高,差异具有统计学意义(P<0.05);夹脊电针组组内比较,与治疗3d的大鼠相比,治疗7d和14天大鼠的BBB评分明显提高,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.Western Blot法检测结果:术后3d、7d、14d各时间点,三组中Rac1蛋白表达最低的为假手术组,其余两组Rac1蛋白表达相对较高,且夹脊电针组经治疗后,Rac1蛋白表达出现了一定幅度的提升。与假手术组相比,模型组的Rac1蛋白表达明显提高,差异存在统计学意义(P<0.05);与模型组相比,Rac1蛋白表达的增加体现在夹脊电针组的所有时间点上,差异具有统计学意义(P<0.05);夹脊电针组组内比较;与夹脊电针组3d组比较,明显提升的是其7d组和14d组,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.HE染色结果:三组中组织结构完整性与清晰度最高的是假手术组,大鼠脊髓中央管表现为正常结构,灰、白质排列整齐,边界范围清晰,神经元量和胶质细胞数量分布均衡、胞体圆润、神经胶质细胞形态比较正常,无坏死、水肿。模型组3d时,脊髓组织结构并不完整,破坏明显,神经元出现肿胀坏死数量增多,脊髓组织内可见炎性细胞;7d时,脊髓组织破坏严重,残存的细胞胞体肿胀变形,神经胶质细胞和炎性细胞增多,神经元缺失较明显;14d时,可见有灶性液化性坏死和神经细胞空泡形成,损伤组织远端仅可见少量残存的神经元组织存在,大部分的神经元已萎缩消失,炎性细胞浸润,胶质细胞增生。夹脊电针组3d、7d、14d,随着治疗时间的增加,神经元数量有所增加,组织间水肿现象得到明显改善,结构松散化及组织丢失的情况已有所好转,炎性细胞也逐渐减少,炎性病灶浸润损害程度逐步减轻。结论:1.夹脊电针能够促进轴突再生,改善大鼠的神经、运动功能,其机制可能与其上调损伤区Rac1蛋白表达水平有关。2.夹脊电针可发挥神经保护作用,促进大鼠受损脊髓组织结构的修复。
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