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目的:探讨吴茱萸产地加工与炮制一体化技术的可行性,初步优选吴茱萸产地加工与炮制一体化工艺,为产地加工与炮制一体化技术的进一步研究奠定基础。
方法:
1.以吴茱萸药材为研究对象,建立吴茱萸次碱与去氢吴茱萸碱、柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸新碱的相对校正因子,计算去氢吴茱萸碱、柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸新碱的含量,实现一测多评;并采用外标法测定吴茱萸中去氢吴茱萸碱、柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、吴茱萸新碱的含量,比较计算值与实测值的差异。
2.采用一测多评法,以去氢吴茱萸碱、柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、吴茱萸新碱的含量为指标,对新鲜吴茱萸采用阴干法、晒干法、烘干法进行产地加工方法优选;采用单因素考察和正交实验,对吴茱萸的炮制工艺进行优化。在产地加工与炮制工艺优化的基础上,将吴茱萸一体化炮制饮片与传统炮制饮片进行以上5个主要成分含量的对比研究。
3.采集中国不同产地的12批吴茱萸药材,建立吴茱萸药材HPLC指纹图谱共有模式,对吴茱萸不同加工方法的生品、炮制品及一体化炮制品药材进行HPLC指纹图谱对比研究。
4.采用小鼠热板法与扭体法实验,研究吴茱萸一体化技术所得饮片与传统炮制饮片对小鼠镇痛作用的影响;采用小鼠肠推进实验,研究吴茱萸一体化技术所得饮片与传统炮制饮片对小鼠止泻作用的影响。
结果:
1.测得的去氢吴茱萸碱、柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸新碱的相对校正因子分别为0.5665、0.0830、1.1550、0.5349,并与外标法的结果相比较,两种方法测得的成分含量的RSD值均小于5%。
2.产地加工工艺以50℃烘干时吴茱萸中5种成分的综合含量最高;吴茱萸炮制的最佳工艺为每100kg吴茱萸,用甘草8kg、闷润2h、炮制温度在140℃~160℃、炮制时间8min。吴茱萸炮制前后5种成分综合含量间P值为0.000,有显著性差异;吴茱萸一体化炮制与传统炮制5种成分综合含量间P值为0.374,无显著性差异。
3.与12批吴茱萸药材的对照指纹图谱共有模式比较,不同加工方法的吴茱萸生品以及炮制品指纹图谱相似度,吴茱萸鲜品炮制与传统炮制相似度均在0.900以上,表明相似度良好。
4.在扭体法实验中,吴茱萸一体化饮片高剂量组与传统炮制饮片高剂量组的P值为0.845,吴茱萸一体化饮片低剂量组与传统炮制饮片低剂量组的P值为0.625,均无显著性差异。在热板法实验中,给药90min后,吴茱萸一体化饮片高剂量组与传统炮制饮片高剂量组的P值为0.127,吴茱萸一体化饮片低剂量组与传统炮制饮片低剂量组的P值为0.263,均无显著性差异。在肠推进实验中,吴茱萸一体化饮片高剂量组与传统炮制饮片高剂量组的P值为0.114,吴茱萸一体化饮片低剂量组与传统炮制饮片低剂量组的P值为0.085,均无显著性差异。
结论:
1.采用一测多评的方法,该方法稳定、测定结果准确,简化了吴茱萸的含量测定方法,提高了对吴茱萸质量控制的技术。
2.吴茱萸产地加工时烘干法较好,温度不宜过高,以50℃为佳。吴茱萸炮制后5种指标性成分的含量均有所降低。吴茱萸一体化炮制所得饮片与传统炮制饮片中5种成分含量无显著性差异,表明吴茱萸产地加工与炮制一体化技术具有可行性。
3.实验收集的12批不同产地吴茱萸药材的HPLC指纹图谱峰共有模式所得色谱图10个共有峰可作为其指纹特征,用于评价不同产地、不同加工方法吴茱萸药材化学成分间的变化。本实验也表明吴茱萸不同加工方法的生品、炮制品及一体化炮制品药材整体化学成分相对稳定。
4.吴茱萸一体化饮片与传统炮制饮片高低剂量组均对小鼠有良好的镇痛作用与止泻作用。吴茱萸一体化饮片与传统炮制饮片药效无明显差异,吴茱萸产地加工与炮制一体化技术具有良好的可行性。
方法:
1.以吴茱萸药材为研究对象,建立吴茱萸次碱与去氢吴茱萸碱、柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸新碱的相对校正因子,计算去氢吴茱萸碱、柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸新碱的含量,实现一测多评;并采用外标法测定吴茱萸中去氢吴茱萸碱、柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、吴茱萸新碱的含量,比较计算值与实测值的差异。
2.采用一测多评法,以去氢吴茱萸碱、柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、吴茱萸新碱的含量为指标,对新鲜吴茱萸采用阴干法、晒干法、烘干法进行产地加工方法优选;采用单因素考察和正交实验,对吴茱萸的炮制工艺进行优化。在产地加工与炮制工艺优化的基础上,将吴茱萸一体化炮制饮片与传统炮制饮片进行以上5个主要成分含量的对比研究。
3.采集中国不同产地的12批吴茱萸药材,建立吴茱萸药材HPLC指纹图谱共有模式,对吴茱萸不同加工方法的生品、炮制品及一体化炮制品药材进行HPLC指纹图谱对比研究。
4.采用小鼠热板法与扭体法实验,研究吴茱萸一体化技术所得饮片与传统炮制饮片对小鼠镇痛作用的影响;采用小鼠肠推进实验,研究吴茱萸一体化技术所得饮片与传统炮制饮片对小鼠止泻作用的影响。
结果:
1.测得的去氢吴茱萸碱、柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸新碱的相对校正因子分别为0.5665、0.0830、1.1550、0.5349,并与外标法的结果相比较,两种方法测得的成分含量的RSD值均小于5%。
2.产地加工工艺以50℃烘干时吴茱萸中5种成分的综合含量最高;吴茱萸炮制的最佳工艺为每100kg吴茱萸,用甘草8kg、闷润2h、炮制温度在140℃~160℃、炮制时间8min。吴茱萸炮制前后5种成分综合含量间P值为0.000,有显著性差异;吴茱萸一体化炮制与传统炮制5种成分综合含量间P值为0.374,无显著性差异。
3.与12批吴茱萸药材的对照指纹图谱共有模式比较,不同加工方法的吴茱萸生品以及炮制品指纹图谱相似度,吴茱萸鲜品炮制与传统炮制相似度均在0.900以上,表明相似度良好。
4.在扭体法实验中,吴茱萸一体化饮片高剂量组与传统炮制饮片高剂量组的P值为0.845,吴茱萸一体化饮片低剂量组与传统炮制饮片低剂量组的P值为0.625,均无显著性差异。在热板法实验中,给药90min后,吴茱萸一体化饮片高剂量组与传统炮制饮片高剂量组的P值为0.127,吴茱萸一体化饮片低剂量组与传统炮制饮片低剂量组的P值为0.263,均无显著性差异。在肠推进实验中,吴茱萸一体化饮片高剂量组与传统炮制饮片高剂量组的P值为0.114,吴茱萸一体化饮片低剂量组与传统炮制饮片低剂量组的P值为0.085,均无显著性差异。
结论:
1.采用一测多评的方法,该方法稳定、测定结果准确,简化了吴茱萸的含量测定方法,提高了对吴茱萸质量控制的技术。
2.吴茱萸产地加工时烘干法较好,温度不宜过高,以50℃为佳。吴茱萸炮制后5种指标性成分的含量均有所降低。吴茱萸一体化炮制所得饮片与传统炮制饮片中5种成分含量无显著性差异,表明吴茱萸产地加工与炮制一体化技术具有可行性。
3.实验收集的12批不同产地吴茱萸药材的HPLC指纹图谱峰共有模式所得色谱图10个共有峰可作为其指纹特征,用于评价不同产地、不同加工方法吴茱萸药材化学成分间的变化。本实验也表明吴茱萸不同加工方法的生品、炮制品及一体化炮制品药材整体化学成分相对稳定。
4.吴茱萸一体化饮片与传统炮制饮片高低剂量组均对小鼠有良好的镇痛作用与止泻作用。吴茱萸一体化饮片与传统炮制饮片药效无明显差异,吴茱萸产地加工与炮制一体化技术具有良好的可行性。