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目的: 观察经已知牵涉皮区给予局麻药对急性内脏痛动物行为学的影响及脊髓表达趋化因子CX3CR1及其配体FKN的变化,为经牵涉皮区逆向镇痛的可行提供实验依据。
材料和方法: 雌性成年SD大鼠(200~250g)。随机分为四组:福尔马林组、福尔马林-牵涉皮区镇痛组、福尔马林-非牵涉皮区镇痛组、SHAM组。观察各组的行为学表现并记录内脏痛评分。并采用免疫荧光技术镜检各组大鼠脊髓CX3CR1和FKN的表达变化。
结果:
1. 行为学表现
1.1 福尔马林组 子宫腔内注射福尔马林后1~2min,动物即出现痛反应,如舔腹部或外阴区域,后肢后伸,躯干扭曲,全身收缩伴或不伴痉挛等。可观察到伤害性反应持续约30min,注射后15min内反应最为明显,45min后反应逐渐消退。疼痛评分为(127.6±13.3)。
1.2 福尔马林-牵涉皮区镇痛组 评分标准同福尔马林组。疼痛评分为(64.4±6.7)。
1.3 福尔马林-非牵涉皮区镇痛组 评分标准同福尔马林组。疼痛评分为(125.8±12.2)。
1.4 SHAM组 子宫腔内给予生理盐水0.1~0.15ml,动物几乎不出现痛反应。偶见如舔腹部或外阴区域等。疼痛评分为(4.0±1.8)。
组间比较:福尔马林组vs福尔马林-牵涉皮区镇痛组、SHAM组有明显差别(P<0.05),福尔马林组vs福尔马林-非牵涉皮区镇痛组没有明显差别(P>0.05);福尔马林-牵涉皮区镇痛组vs福尔马林-非牵涉皮区镇痛组、SHAM组有明显差别(P<0.05),福尔马林-非牵涉皮区镇痛组vs SHAM组有明显差别(P<0.05)。
2. CX3CR1和FKN表达
2.1 福尔马林组 骶髓CX3CR1和FKN表达明显增加,且大多聚集在神经元周围,呈现出明显的圆形或椭圆形。
2.2 福尔马林-牵涉皮区镇痛组 大鼠骶髓几乎没有CX3CR1和FKN表达。
2.3 福尔马林-非牵涉皮区镇痛组 大鼠骶髓CX3CR1和FKN表达明显增加,大多聚集在神经元周围,呈圆形或椭圆形。
2.4 SHAM组 没有CX3CR1和FKN表达。
结论:
1. 正常条件下大鼠脊髓几乎没有CX3CR1和FKN表达。
2. 福尔马林致急性炎性内脏痛痛后大鼠脊髓内神经元和小胶质细胞分别表达FKN和CX3CR1,且牵涉皮区给予抑痛药物可以使其表达降低,提示了FKN和CX3CR1可能参与脊髓水平的内脏痛的调控,也提示了经牵涉皮区逆向镇痛是可行