【摘 要】
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给SPF鸡人工接种鸡传染性法氏囊病病毒中国超强毒株Harbin-1,3日后采取法氏囊,用LiCl分级沉淀方法纯化病毒基因组dsRNA,通过RT-PCR分别分两段扩增获得A、B两个节段的cDNA片段
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给SPF鸡人工接种鸡传染性法氏囊病病毒中国超强毒株Harbin-1,3日后采取法氏囊,用LiCl分级沉淀方法纯化病毒基因组dsRNA,通过RT-PCR分别分两段扩增获得A、B两个节段的cDNA片段Pal2与Pa34、Pb12与Pb34.将四个cDNA片段分别克隆到pGEM-T载体上测序,然后进行序列分析.将通过RT-PCR得到的cDNA在pGEM-T载体上进行全长A、B片段的拼接,结果PCR扩增得到的产物其分子量大小与全长A、B片段相符,酶切鉴定也证明Pa12与Pa34、Pb12与Pb34的连接是成功的.结果为病毒结构和分子流行病学分析提供了可靠的依据和必要的物质条件,也为重组基因工程疫苗的开发和VP1功能的研究奠定了基础.该文还应用原位PCR方法对鸡传染性氏囊病病毒的早期侵染进行了研究.结果表明,病毒的入侵速度是很快的,在接种后4hr以内即从入侵门户通过血液循环到达靶器官.在阳性信号检出的时间上,法氏囊较肾、脾等组织是滞后的.H毒株较Ts毒株在早期对法氏囊具有更强的侵染能力.该研究为IBDV检测尝试了一种新的方法,大大的提高了检测了的灵敏度.IBDV侵染过程的研究对IBD的防治具有一定的实际意义.
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