NE在重度脑损伤大鼠肺内和血中动态变化及其意义研究

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目的:探讨中性粒细胞弹性蛋白酶(Neutrophil Elastase,NE)在重度脑损伤继发肺损伤中的作用,为重度脑损伤患者早期实施肺保护提供有价值的实验依据。方法:①采用改进型Feeney法建立大鼠重度脑损伤模型。②雄性SD大鼠60只,随机分为五组:对照组(C组,n=8)和实验组(分为T1、T2、T3和T4组,每组13只)。T1~T4组大鼠分别在给予重度脑损伤后6、24、48和72小时处死。对照组正常喂养,不给予任何损伤处理。③分别称量脑组织湿重和干重,计算脑组织含水量;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血浆及支气管肺泡灌洗液(BALF)中NE含量:免疫透射比浊法测定BALF中白蛋白浓度;光学及电子显微镜观察肺组织病理改变。④数据采用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果:①T1~T4组大鼠致伤后立即出现呼吸暂停数秒至数分钟后自行恢复,随后呼吸急促,伴有全身抽搐、偏瘫及昏迷;T1~T4组18%大鼠出现呼吸困难,口唇、四肢发绀及口鼻有泡沫样血性分泌物;脑组织外观和HE染色显示脑挫裂伤、脑出血、脑水肿征象:T1~T4组脑组织含水量均显著增高,与C组比较有统计学意义(P<0.01)。②肺组织形态学改变,肉眼观察T1~T4组21%大鼠肺组织可见不同程度的充血、水肿,表面可见点状或灶状出血;光镜观察T1组45%大鼠肺组织结构基本正常,45%为轻度损伤,10%为重度损伤,T2~T4组轻度损伤为42~50%,重度损伤为22~29%;电镜观察T1~T4组大鼠有不同程度的肺毛细血管内皮细胞肿胀,毛细血管扩张、充血,线粒体肿胀,绒毛消失,板层体排空。③T1~T4组BALF和血浆中NE含量明显升高,与C组比较有统计学意义(P<0.01),其中T2增高最明显,T3~T4维持在较高水平,与T2组比较无统计学意义(P>0.05);血浆NE含量变化与BALF中NE呈正相关(P<0.01)。④T1组BALF中自蛋白浓度略有升高,但与C组比较无统计学意义(P>0.05),T2~T4升高明显,与C组比较有统计学意义(P<0.05):血浆、BALF中NE含量变化与BALF中白蛋白浓度呈正相关(P<0.01);血浆中NE、BALF中白蛋白浓度与脑组织含水量也呈正相关(P<0.05或P<0.01)。结论:①改进型Feeney法是一种较为理想的脑损伤模型制作方法。②重度脑损伤可导致不同程度的肺组织损伤,其中24~72小时损伤最为显著。③NE是重度脑损伤继发肺损伤的重要原因之一,并且肺内NE升高与肺损伤的关系更为密切。
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