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背景:肾小球血管上皮细胞(足细胞)与肾小球基底膜(GBM)、毛细血管内皮细胞一起构成肾小球滤过屏障。各种因素导致的足细胞损伤和丢失都可能导致大量蛋白尿,也与肾脏病进展相关。成熟的足细胞是一种终末分化的上皮细胞,缺乏分裂增殖能力,不能通过自我增殖来补充丢失的足细胞。因此减少足细胞的损伤和增加足细胞的数量可能是减轻蛋白尿,延缓肾病进展的一种重要途径。近期研究发现壁层上皮细胞(the parietal epithelial cells,PECs)能在生理及病理情况下表达足细胞蛋白。PECs和足细胞拥有一个共同的细胞起源,同时在解剖位置上两者相互毗邻,这使得PECs具有再生足细胞的潜能。我们前期研究发现,腺苷酸环化酶(cAMP)激动剂Forskolin可通过激活肾小球内cAMP信号部分缓解阿霉素肾病诱小鼠白蛋白尿和足细胞丢失。体外实验发现蛋白激酶A(PKA)激动剂pCPT-cAMP可直接激活PKA信号可防止ADR诱导的足细胞凋亡和数量减少。但是我们不清楚激活cAMP/PKA信号,能否防止阿霉素肾病小鼠中足细胞的损伤和丢失,并促进PECs向足细胞分化。目的:探讨PKA激动剂pCPT-cAMP对阿霉素肾病小鼠的保护作用,以及pCPT-cAMP是否促进壁层上皮细胞分化。方法:我们使用6-8周龄Balb/C雄性小鼠,予以ADR(11mg/kg)尾静脉注射构建阿霉素肾病小鼠模型(ADR组),部分小鼠使用pCPT-cAMP腹腔注射治疗(A+P组)。使用蛋白电泳+考马斯染色方法观察小鼠尿白蛋白变化;糖原染色(Periodic Acid-Schiff stain,PAS)和六胺银染色观察肾脏组织病理学改变。WT-1免疫组化染色观察足细胞数量,synaptopdodin和desmin免疫荧光双染观察足细胞的损伤。PCNA和claudin1免疫荧光双染检测PECs增殖,CD44和nestin免疫荧光双染观察PECs活化,p57和claudin1免疫荧光双染检测PECs向足细胞分化。结果:对照组小鼠尿中无中大分子蛋白,ADR肾病小鼠第二周及第八周时小鼠尿电泳中中大分子蛋白增多,尿白蛋白/肌酐比值显著升高,pCPT-cAMP治疗则降低ADR肾病小鼠的尿白蛋白/肌酐比值,ADR组和A+P组尿白蛋白/肌酐比值第二周分别是8.07±3.95(mg/mg)和6.06±5.8(mg/mg),P<0.05。第八周时两组尿白蛋白/肌酐比值分别是21.83±12.7(mg/mg)和6.37±3.78(mg/mg),P<0.05。PAS染色发现ADR小鼠肾小球硬化在第八周明显增多,对照组、ADR组和A+P组的硬化指数分别是0.13±0.34,1.64±1.65和0.85±1.30,P<0.0001。WT-1免疫组化染色发现ADR组小鼠肾小球足细胞数量较对照组显著降低,第二周和第八周足细胞数分别为4.72±1.67 vs.7.89±1.77和1.64±1.86 vs.8.26±2.79,P<0.001。pCPT-cAMP可防止ADR肾病小鼠的足细胞数量减少,第2周和第8周分别为6.97±1.79和5.35±1.62(和ADR组比较,P均<0.001)。免疫荧光染色发现,pCPT-cAMP可显著防止ADR诱导足细胞特异性蛋白synaptopodin和podocalyxin表达下降,降低足细胞损伤标志desmin的表达。相比于ADR组小鼠,pCPT-cAMP降低PCNA~+PECs数量(2.75±3.23 vs 1.02±2.16,ADR组vs.A+P组,P<0.0001)。ADR肾病小鼠PECs重新表达CD44,pCPT-cAMP显著抑制PECsCD44表达。p57/claudin1免疫荧光染色显示,ADR小鼠肾小球中p57~+claudin1~+PECs较对照组明显增多0.276±0.60 vs.0.097±0.30,P<0.05。pCPT-cAMP则使肾小球中p57~+claudin1~+PECs数量进一步增多0.422±0.66 vs.0.276±0.60(A+P vs.ADR,P<0.05)。结论:pCPT-cAMP激活PKA信号后可以减轻ADR肾病小鼠的足细胞损伤,增加足细胞数量,减轻蛋白尿。其作用可能与pCPT-cAMP促进ADR肾病小鼠PECs向足细胞分化相关。