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目的：本研究分别采用小鼠暂时性大脑中动脉缺血（transient middle cerebral occlusion,tMCAO）再灌注损伤和缺氧/缺糖损伤（oxygen-glucose deprivation, OGD）神经元两种模型，探讨去乙酰化酶抑制剂（histone deacetylase inhibitor, HDACi）对缺血性脑卒中的保护作用及其相关机制，为临床应用HDACi治疗脑缺血性疾病奠定实验基础。方法：1、健康雄性Balb/c小鼠随机分为2组：伪手术（Sham）组和I/R组。I/R组按照改良Zea-longa线栓法建立小鼠左侧大脑中动脉缺血30min再灌注损伤模型。Sham组的手术操作与I/R组相同，但不进行大脑中动脉阻塞。I/R组分为三个亚组：I/R24h组、I/R48h组、I/R72h组。于术后24h后进行神经功能缺陷评分，各组小鼠在相应时间点处死取脑，TTC染色检测脑梗死体积。2、健康雄性Balb/c小鼠随机分为4组：Sham组、I/R组、SAHA组和DMSO对照组。采用改良Zea-longa线栓法阻断大脑中动脉供血30min，再灌注48h制备小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。SAHA组分为三个亚组，分别于脑缺血前1h腹腔注射不同剂量的SAHA：SAHA1组-12.5mg/Kg；SAHA2组-25mg/Kg；SAHA3组-50mg/Kg。DMSO组：小鼠脑缺血前1h腹腔注射25%DMSO0.1ml。于术后24h后进行神经功能缺陷评分，再灌注损伤48h后处死取脑，分别进行TTC染色测量脑梗死体积以及Western blot检测脑组织蛋白的乙酰化水平变化情况。3、建立SH-SY5Y细胞不同持续时间OGD损伤模型，检测不同浓度的HDACi对OGD诱导的神经元损伤的影响，实验指标如下：倒置显微镜观察细胞形态学变化，MTT法检测细胞活性，Propidium iodide（PI）和Hoechst33258染色检测细胞凋亡与坏死情况，乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase, LDH）法检测细胞损伤，荧光显微镜或流式细胞术检测各组细胞内活性氧（reactive oxygen species, ROS）含量和线粒体膜电位（mitochondrion membranepotential, MMP）的变化，Western blot检测各组细胞乙酰化水平的变化。结果：1、神经功能缺陷评分显示，与Sham组相比较，I/R组出现不同程度的神经功能障碍，评分为2.60±0.15，Sham组无神经功能缺陷。TTC染色显示I/R组小鼠有明显的梗死灶，Sham组则无，差异有统计学意义。2、Western blot结果显示，与Sham组相比较，I/R组小鼠缺血侧大脑的乙酰化水平显著下降。SAHA在腹腔注射6h可显著升高正常小鼠脑蛋白的乙酰化水平（P<0.05），24h后与Control组无显著差异。25mg/Kg和50mg/Kg SAHA可显著抑制脑缺血诱导的乙酰化水平下降。神经功能缺陷评分和TTC染色结果显示：与Sham组相比较，SAHA组和I/R组均出现不同程度的神经功能缺损症状，评分在1~3分之间，Sham组无神经功能障碍。与I/R组相比较，SAHA12.5mg/Kg组无明显改善小鼠的神经功能缺陷评分，脑梗死体积虽有所减少，但无统计学差异。SAHA25mg/Kg和50mg/Kg组均显著降低小鼠神经功能缺陷评分，明显减少脑梗死体积，与I/R组相比较，分别减少脑梗死体积42.92%和56.53%。3、OGD损伤2h，模型组的细胞活性、乙酰化水平和MMP水平较对照组显著降低，并随OGD时间的延长而变化越明显。而ROS含量较对照组显著升高，Hoechst和PI双染检测也发现染色质凝聚，核碎裂，凋亡小体产生，并随OGD时间的延长，凋亡和坏死细胞的数量增加。与模型组相比，TSA和SAHA均能明显提高OGD诱导的神经元损伤的活性，改善细胞形态。此外，0.5μmol/L SAHA可明显减少OGD引起的神经元凋亡和坏死数量，减轻细胞LDH释放，降低细胞内ROS含量，及提高MMP和蛋白质的乙酰化水平。结论：1、改良Zea-longa线栓法是一种简单、可靠的构建小鼠tMCAO模型的方法，MCAO30min再灌注48h可引起稳定的梗死灶，适合于脑缺血再灌注损伤的研究。2、SAHA预处理可减少脑缺血再灌注损伤小鼠的脑梗死体积，改善神经生物学功能，对MCAO小鼠具有一定的脑保护作用，其作用机制有待进一步研究。3、HDACi对OGD诱导SH-SY5Y细胞缺氧/缺糖损伤具有明显的保护作用，其作用机制可能与降低细胞内ROS水平及维持MMP的高能状态有关。