大口黑鲈EST数据库分析及与生长相关的分子标记筛选

来源 :上海海洋大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:ayun33
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
大口黑鲈是遗传研究和基因信息比较缺乏的物种。目前大口黑鲈可利用的有效标记数量有限,建立表达序列标签(EST)数据库,为SSR和SNP的开发提供了新的途径。本研究应用高通量罗氏454测序技术对大口黑鲈北方亚种和佛罗里达亚种进行转录组测序并建立ESTs数据库,并以文库为基础进行大口黑鲈SSR和SNP的筛选及生长性状的关联分析,主要研究内容和结果如下:1、大口黑鲈两个亚种EST数据库的构建和分析应用新一代高通量测序技术Roche454对大口黑鲈北方亚种(M. salmoidessalmoides)和佛罗里达亚种(M. salmoides floridanus)进行转录组测序并建立ESTs数据库,结果得到北方亚种ESTs序列468671条,佛罗里达亚种ESTs序列332322条,两亚种ESTs序列的平均长度分别为306.5bp和304.4bp。将得到的高质量序列进行拼接,大口黑鲈北方亚种和佛罗里达亚种共得到contig序列总数分别为42056条和35743条,平均长度分别是612.6bp和588.2bp。将大口黑鲈北方亚种和佛罗里达亚种的数据库合并,通过与蛋白数据库比对后,共78938条EST序列被注释,根据Gene Ontology(GO)信息,对序列按照分子功能、细胞组成、生物学过程进行分类。通过对大口黑鲈合并的EST库信息进行大通量SSR和SNP位点的发掘,发现了含SSRs和SNPs的序列分别是25469和8547条。从EST数据库中随机选取75条contigs进行北方亚种和佛罗里达亚种的序列比较,结果表明两个亚种EST序列同源性为99.2%。2、大口黑鲈EST-SSR标记的开发选取133条SSRs序列并设计引物,其中15对能够扩增出带型清晰且有多态性的谱带。用这15对引物分析大口黑鲈微卫星的多态性,结果表明:每个位点检测到的等位基因数为2-5个,平均等位基因是2.533个,观测杂合度(Ho)和期望杂合度(He)的范围分别为0.150-0.857(平均0.480)和0.262-0.739(平均0.550),平均多态信息含量(PIC)的范围为0.261-0.740(平均0.384)。Hardy-Weinberg平衡的卡方检验结果表明15个位点中只有一个位点(Contig44566)严重偏离了平衡。3、大口黑鲈SNP的筛选及载脂蛋白部分序列上SNP多态性与生长相关的分析根据大口黑鲈EST库中的载脂蛋白、激活素、锌指蛋白等生长代谢基因的10个片段设计引物扩增,结果共得到了14个SNP位点。为进一步研究其中载脂蛋白(载脂蛋白A1、载脂蛋白A4和载脂蛋白C1)基因上的SNP位点,将其在另外一个群体中进行验证,结果表明大口黑鲈载脂蛋白A1基因上有1个颠换SNP位点:A+489C;载脂蛋白A4上筛到1个转换SNP位点:A+633T;载脂蛋白C1上筛到2个颠换SNP位点:A+24G和A+75C。采用SnapShot的方法分别对同一群体的159尾大口黑鲈的这4个位点进行检测和分型,统计基因型频率,并利用一般线性模型分析4个SNPs位点与大口黑鲈体质量、全长等重要生长性状的相关性,分析结果表明:在载脂蛋白A1基因上A+489C位点的不同基因型与体重和高之间存在显著的相关性(P<0.05)。载脂蛋白A4和载脂蛋白C1基因上的A+633T、A+24G和A+75C位点的不同的基因型与鱼的体重、体高和全长的相关性显著(P<0.05)。
其他文献
近些年,大型海洋工程技术装备开始备受关注,一些大型远洋渔船陆续引进了较为先进的渔船吸鱼装备,但都是被国外淘汰的设备,且引进费用极高。目前国内使用的吸鱼装备,通常由真空泵、
大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)是一种栖息于沿海地区红树林生态系统和滩涂的两栖鱼类,从非洲西海岸到整个印度-西太平洋地区均有分布。氧浓度变化较大影响动物的正常
摘 要: 幼儿园区角游戏是“人为创设的自然情景下的幼儿游戏”,为幼儿构建了一个独立自主探究的平台。它既是幼儿园课程的重要组成部分,又是幼儿园分组教学的重要场所,还是幼儿园自主游戏的重要场所。幼儿在区角活动中可以根据自己的兴趣、能力、意愿选择游戏,这就为他们提供了成功的机会。因为区角活动是自选的,所以幼儿可以自我调节需要,保持愉悦的情绪,积极主动地参与活动。同时区角渗透了教育目的要求,是有目的的教育
摘 要: 由于幼儿教育是一个人对世界的事物进行系统认知的前提,对一个人的发展起着重要作用,因此人们开始越来越重视幼儿阶段的教育情况。本文通过现阶段对于幼儿园游戏教育的认知,通过一些实际的案例探讨现阶段幼儿园游戏教育所存在的一系列问题,探索寻求游戏教学更好的方法和教学模式。  关键词: 幼儿园教学 作用 途径  受我国传统的教学观念的影响,我国在幼儿的教学方面还普遍存在重视系统的知识教学,而忽视游戏
摘 要: 社会的飞速发展,使家用电器普及千家万户,其中全自动洗衣机就是家庭中必不可少的家用电器,普及程度越高,带来了使用、维护和检修等诸多问题。本文介绍波轮式全自动洗衣机的常见故障及其检修方法。  关键词: 波轮式全自动 洗衣机 常见故障 检修方法  随着社会的飞速发展,家用电器日新月异,智能化家居的概念已经进入不少人的现实生活,全自动洗衣机就是现在家庭里必不可少的一件家用电器产品。生活中的普及,
摘 要: 通过对《孙氏家乘》中记载的晚清723例男女死亡月份调查研究得知,一月份死亡人数最少,仅有47人,是月平均死亡人数的0.61倍,占总死亡人数的5%。按季度排序得出男女死亡人数的百分比顺序是第三季度>第四季度>第二季度>第一季度,从中可以看出下半年的死亡人数比上半年的死亡人数多,尤其是秋冬之际。通过此调查,掌握死亡时间的集中期,对当今的老年护理、临床护理、临终关怀有一定的指导意义。此次家谱调
由于养殖企业和养殖户长期的不合理选种造成近亲繁殖,加上不科学的养殖方式和日益恶劣的养殖海区环境,合浦珠母贝养殖过程中出现了生长缓慢,病害频发和死亡率高的现象,因此培育生