机械牵张应力对小儿指骨骺板软骨细胞增殖分化和凋亡的影响

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【目的】观察不同强度的机械牵张应力刺激对体外培养的小儿指骨骺板软骨细胞增殖分化和凋亡的影响。【方法】体外分离培养多指患儿切除多指的指骨骺板软骨细胞,甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色予以鉴定,用四点弯曲细胞力学加载装置分别对细胞进行不同强度的周期性牵张应力刺激(刺激强度分别为2000μ strain、4000μ strain,刺激时间6h、刺激频率0.5Hz),未刺激组为对照组,采用荧光定量RT-PCR技术检测各组细胞的细胞增殖核抗原(PCNA)、软骨特征性细胞外基质(COLII、COLX)、凋亡相关基因(BAX、BCL-2)及PThrP的mRNA表达情况。【结果】在2000μ strain的周期性牵张应力刺激下,小儿指骨骺板软骨细胞COLII、COLX、PThrP mRNA表达水平明显增强并高于对照组(P<0.05),PCNA mRNA表达水平也增加但差异无统计学意义(P>0.05),而在4000μ strain的周期性牵张应力刺激下,PCNA、COLII、PThrP mRNA表达明显下降并低于对照组(P<0.05),COLXmRNA表达水平稍有下降但差异无统计学意义(P>0.05),且BCL-2、BAX mRNA表达水平的比值与对照组相比逐渐升高,刺激强度越大,比值升高越明显,2000μ strain和4000μ strain刺激下差异均有统计学意义(P<0.05)。【结论】小儿指骨骺板软骨细胞的增殖分化和凋亡受机械牵张应力所调节,适当的牵张应力刺激能有效促进其增殖分化,而过大牵张应力刺激则抑制增殖分化,促进细胞凋亡,PThrP在这一过程中可能起重要调控作用。
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