【摘 要】
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目的:探讨DEC1基因过表达对人食管癌ECA109细胞的增殖和侵袭能力的影响,检测过表达DEC1基因细胞中金属基质蛋白酶MMP9、细胞周期蛋白cyclinDl的蛋白表达情况,探讨该基因可能作
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目的:探讨DEC1基因过表达对人食管癌ECA109细胞的增殖和侵袭能力的影响,检测过表达DEC1基因细胞中金属基质蛋白酶MMP9、细胞周期蛋白cyclinDl的蛋白表达情况,探讨该基因可能作用机制。方法:1.根据DEC1基因在Genebank中的cDNA序列(NM 003670.2)构建pcDNA3.1(-) /DEC1 (DEC1组)和pcDNA3.1 (-) (vector组)质粒,并利用脂质体分别转染至人食管癌ECA109细胞中,并检测构建成功,分为实验分组为DEC1组(pcDNA3.1 (-)/DEC1)和vector组(pcDNA3.1 (-)).2. real-time PCR检测转染48 h后的细胞内DEC1基因mRNA表达。3. Western blot分别检测转染72 h后细胞内DEC1、金属基质蛋白酶MMP9及细胞周期蛋白cyclinDl的蛋白表达。4.CCK-8实验,平板集落实验检测DEC1基因过表达对细胞的增殖能力的影响。5. Transwell实验检测DEC1基因过表达对细胞的侵袭能力的影响。结果:1.与vector组相比,DEC1组中DEC1的表达明显增高(P<0.01)2.与vector组相比,DEC1组中cyclinDl, MMP9表达明显降低(P<0.05)。3.与vector组相比,DEC1组中细胞增殖与侵袭能力明显受到抑制(P<0.01)。结论:过表达DEC1可明显抑制ECA109细胞增殖和侵袭能力,DEC1可能通过调节MMP9、cyclin D1表达而发挥作用。
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