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目的:寻找肝素酶(heparanase,HPSE)影响肝癌细胞与血管内皮细胞粘附的分子学证据,并获得HPSE参与肝癌微血管捕获的细胞学证据。方法:1)设计HPSE基因干扰序列并构建质粒,以脂质体法瞬时转染细胞后通过Real-time qPCR和Western-Blot筛选出最优干扰序列;构建HPSE基因过表达慢病毒,感染细胞后运用Real-time qPCR和Western-Blot检验感染效果。2)以上述筛选的最优干扰序列转染HepG-2细胞抑制HPSE基因表达,同时设置非转染组、阴性对照组和空转组,96孔板中观察各组细胞与内皮细胞HUVEC-C粘附情况,以0.25%Rose Bengal染色,脱色后测量各孔OD值并分析比较。3)以HPSE过表达慢病毒载体感染MHCC97-H细胞,同时设置非感染组和阴性对照组,96孔板中观察各组细胞与内皮细胞HUVEC-C粘附情况,并观察各组细胞在Transwell小室中跨内皮细胞迁移情况,以0.25%Rose Bengal染色,脱色后测量各孔OD值并分析比较。结果:1)成功筛选出HPSE基因最优干扰序列siHPSE-3158,并验证了慢病毒载体可使MHCC97-H细胞中HPSE基因过表达;2)排除内皮细胞的影响后,非转染组HepG-2细胞与内皮细胞粘附率(0.351±0.030)高于HPSE基因干扰组(0.239±0.019,P<0.01);阴性对照组(0.291±0.027)和空转组(0.297±0.032)粘附率均低于非转染组(P<0.05),但高于HPSE基因干扰组(P<0.05);阴性对照组和空转组粘附率无明显差异(P>0.05);3)排除内皮细胞的影响后,HPSE过表达组MHCC97-H细胞与内皮细胞粘附率(0.512±0.049)明显高于其余两组(P<0.01),阴性对照组(0.370±0.027)与未处理组的MHCC97-H细胞组(0.377±0.050)与内皮细胞粘附率无统计学差异(P>0.05);4)排除内皮细胞的影响后,HPSE过表达组MHCC97-H细胞跨内皮细胞迁移数量(0.431±0.043)多于明显其余两组(P<0.01),阴性对照组(0.306±0.026)与未处理组(0.295±0.044)的MHCC97-H细胞跨内皮细胞迁移数量无统计学差异(P>0.05)。结论:运用基因干扰、过表达及体外实验等手段,证实HPSE在促进肝癌细胞与血管内皮细胞粘附以及跨内皮细胞迁移等方面发挥重要作用,参与介导了肝癌微血管捕获过程。