一、背景资料 腰椎间盘的退行性变所引起的一系列疾病在临床上极为常见，其中髓核的退变较纤维环和软骨终板更明显。主要表现为硫酸软骨素、硫酸角质素成分的改变，以及水份含量的降低，从而导致髓核生物力学特性的改变，产生一系列临床症状。因此，正确地评价髓核的退变程度，对临床上椎间盘退变疾病的诊断、治疗及预后具有重要意义。目前，临床上常采用髓核MRI的信号强度作为评价髓核退变的指标。然而，髓核退变的病理本质是硫酸软骨素和硫酸角质素成分的改变。遗憾的是，迄今为止，对于髓核MRI信号强度与其病理改变之间的关系，国内外尚未见报道。 二、目的 本研究通过观察腰椎间盘髓核退变的病理学改变，并分析它与影像学表现的关系，旨在为临床应用髓核影像学指标评价其退变程度提供直接的证据。 三、材料与方法 1、临床资料 本实验病例组选取2001年1月至2001年12月本院因椎间盘疾患手 硝 户 人 牙 硕 士 学 位 论 文 踢 术病人，根据年龄分为三组：青年组，年龄2130岁，平均26．9岁，男7 例7个，女2例3个，共9例10个间盘；中年组，年龄31－50岁，平均43．7 岁，男33例35个，女28例33个，共61例68个间盘；老年组，年龄5175 岁，平均59．9岁，男11例12个，女11例11个，共22例23个间盘。对 照组共6例，4例6个间盘取自腰椎骨折手术病人（既往无腰痛史），2例 IO个问盘取自脑死亡病人（死亡时问小于二小时），年龄m－3O岁，平均 乃．1岁，男4例14个间盘，女2例Z个间盘。共计口7个问盘，其中LI 2间盘7个，u－3间盘9个，u－4问盘5个，L个5问盘叩个，u引间 盘47个。 L标本制备 对照组取标本前肉眼检查均无明显椎间盘病变。手术摘取典型髓核 组织，切取约0．5x0．5x0．scm一小块，10％甲醛固定，常规石蜡包埋。其 余标本测湿重后于60℃恒温鼓风干燥箱放置24小时后测干重，计算水份 含量。 3、Alcian blue临界电解质浓度（CEC）染色 原理：髓核的蛋白多糖（PG）分子内含有梭基、硫酸基等阴性基团， 易与阳离于染料Alcian blue结合而呈现特征性的蓝色。，“染液中加入一种 不带颜色的阳离子镁离于时，镁离子便会与染料竞争结合阴性基团。由于 蛋白多糖各成分与 Alcian blue亲和力不同，随着镁离子浓度的增高，与 Alcian blue亲合力较低的蛋白多糖成分被镁离子结合而不显色，只有与 Alcian blue亲和力高的蛋白多糖成分仍然着色。故可用 Alcian blue不同 的镁离子浓度区分蛋白多糖的成分。蛋白多糖各成分着色发生改变时的镁 离于浓度即为该成分的临界电解质浓度，即 CEC值。硫酸角质素（KS） 第2页 扯 户 人 穿 硕 士 学 位 论 文 濒 与Alcian blue亲和力最高，在镁离子浓度为 0．9％时仍显色，故硫酸角质 素的 CEC值为 0．9％。硫酸软骨素（CS）与 Alcian blue亲和力较低，在 镁离子浓度为0．45％时显色，在镁离子浓度为09％时不显色，故硫酸软骨 素的 CEC值为 0．450。透明质酸（HA）与 Alcian blue亲和力最低，在镁 离于浓度为0刀5％时显色，在镁离子浓度为0．45％时即不显色，故透明质 酸的 CEC值为 0．05％。因此可用 CECO刀5％、CECO．45％和 CECO．9％频数 的变化作为指数反映透明质酸、硫酸软骨素和硫酸角质素含量的变化。 本实验所用的 Alcian blue采用 Sigma公司的 Alcian blue SGX。 所有蜡块统一切片，片厚4pn1。每个蜡块连续切片4张，1 张常规 HE染色；其余3张为一组，标为A、B、C，分别置于镁离子浓度为0刀5％。 0．45％、0．9％的 0刀5％Alcian blue醋酸缓冲液（PHS．引 中染色c OlymPus BX51数码相机摄片并输入计算机处理。计算机工作平台： N11 55O机型，h阶ceZ＊X二00显卡，＊ny M山hs＊＊n0OO显不器：图形 处理软件Photoshop6．0。将着色结果分为一、士、＋、＋＋、＋＋＋共5个级别。 每个标本A、B、C3张切片图像作为一组进行着色比较。选取每组图像 上某一共同点为轴心，画一坐标轴。3 张图像上随机选取相同坐标位置的 10个smmxsmm区域，观察着色分级情况。记录各区域着色分级发生改 变时的镁离子浓度，此镁离子浓度即为该区域的CEC值。记录各组标本 的各个CEC值的频数。本实验CEC染色结果由两个判读者同时独立完成。 4、MRI上测量髓核的相对信号强度（RSI?