研究背景2型糖尿病是动脉粥样硬化的独立危险因素。慢性系统性炎症是2型糖尿病和动脉粥样硬化的共同土壤。脂肪是系统性炎症的主要来源。相比于皮下脂肪,内脏脂肪能够产生释放更多的炎症因子。炎症的内脏脂肪通过驱动系统性炎症加速动脉粥样硬化的发展。因此,探讨调控内脏脂肪炎症的分子机制是治疗糖尿病和动脉粥样硬化的关键靶点。内脏脂肪炎症与免疫密不可分,参与脂肪炎症的免疫细胞,包括T淋巴细胞、B细胞与巨噬细胞。我们的前期研究表明,糖尿病内脏脂肪存在巨噬细胞浸润和极化。另外,内脏脂肪巨噬细胞极化同动脉粥样硬化密切相关。然而,巨噬细胞极化并非脂肪炎症的启动因素。T细胞是巨噬细胞极化的上游调节者,参与脂肪功能紊乱的早期炎症发生。促炎的Thl和Th17细胞浸润内脏脂肪组织,克服抑炎的Treg细胞,进而促进巨噬细胞的经典激活和系统性胰岛素抵抗。然而,在2型糖尿病状态下免疫T细胞促炎极化的关键分子机制尚不清楚。PTPN2可能是调控免疫T细胞极化的关键分子。PTPN2是人类基因组编码的38种酪氨酸特异性磷酸酶(PTPs)中的一种,首先从T细胞cDNA库里克隆出来,广泛存在于各种细胞,但在淋巴细胞中呈现高表达,包括T细胞。PTPN2与肝脏胰岛素敏感性密切相关;PTPN2基因敲除小鼠体内炎症表达增加,其基因突变导致的功能缺失会引起血清和小肠内Thl及Th17细胞含量增加,而Treg细胞含量减少。然而PTPN2在脂肪组织免疫T细胞极化的作用尚不清楚。Shields等在乳腺癌患者研究中发现,PTPN2具有调节STAT3信号传导的作用。研究证实,STAT3基因敲除后小鼠脂肪组织Thl/Treg细胞比值下调。但是,PTPN2是否可通过STAT3信号途径调节T细胞极化,减轻内脏脂肪炎症和糖尿病相关的动脉粥样硬化尚未见报道。在本研究中,我们成功建立了2型糖尿病动脉粥样硬化ApoE-/-小鼠模型。通过附睾脂肪局部注射PTPN2过表达腺病毒,探讨了PTPN2过表达是否通过调控脂肪T细胞极化改善炎症与动脉粥样硬化及其相关机制。研究目的(1)探讨2型糖尿病ApoE--小鼠附睾脂肪组织功能学重构和炎症重构;(2)探讨附睾脂肪局部过表达PTPN2对糖尿病ApoE-/-小鼠附睾脂肪组织T细胞极化,巨噬细胞极化和脂肪组织炎症的影响;(3)探讨附睾脂肪局部过表达PTPN2对糖尿病ApoE-/-小鼠系统性炎症和动脉粥样硬化的影响。实验方法(1)动物实验:60只4周龄ApoE-/-雄性小鼠,行IPGTT实验后随机分为普通饮食组(n=30)和糖尿病组(n=30),糖尿病组饲给予高脂饮食(20%脂肪,20%蔗糖,1.25%胆固醇)喂养6周,10周龄行IPGTT实验;出现胰岛素抵抗的小鼠给予一次性腹腔注射小剂量STZ 75mg/kg,12周龄行IPGTT实验,将随机血糖≥1.1 mmol/L的小鼠纳入2型糖尿病组;(2)IPGTT试验:小鼠禁食12小时后,腹腔注射葡萄糖(1.5g/kg),于Omin、15min、30min、60min和120min分别断尾取血检测血糖;(3)ApoE-/-小鼠鼠体重的监测:定期监测小鼠体重的变化;(4)病理学检测:对附睾脂肪组织行HE染色,免疫组织化学染色检测附睾脂肪组织中PTPN2,P-STAT3,T-bet,ROR-γt,foxp3,F4/80,CD11C,CD206,FASN,ATGL,HSL,Perilipin,MCP-1,IL-6,TNF-α和IL-10的表达。对主动脉根部斑块分别进行HE,天狼星红,油红O染色,免疫组化检测斑块内平滑肌肌动蛋白,巨噬细胞和炎症因子(ICAM-1,IL-6,TNF-α和MCP-1)的表达。斑块面积,纤维帽,胶原和脂质计算动脉粥样硬化易损指数;(5)Western Blot检测:提取小鼠附睾脂肪组织蛋白,Western blot检测附睾脂肪组织PTPN2,P-STAT3,STAT3,T-bet,ROR-yt,foxp3,ArgI,ArgⅡ,MCP-1,IL-6,TNF-α和IL-10的表达。提取小鼠主动脉组织蛋白,Western blot检测主动脉ICAM-1,IL-6,TNF-α和MCP-1的表达;(6)流式细胞术检测脂肪组织T细胞亚型;(7)Elisa:Elisa试剂盒检测小鼠血清中IL-6,IFN-γ,TNF-α,MCP-1和CRP的表达。实验结果(1)糖尿病对ApoE-/-小鼠脂肪组织功能的影响与对照组相比,糖尿病组ApoE-/-小鼠附睾脂肪组织重量和附睾脂肪细胞直径明显增加(P<0.05);与对照组相比,糖尿病组ApoE-/-小鼠附睾脂肪组织FASN表达明显增加(P<0.05),ATGL、HSL和Perilipin表达均明显减少(P<0.05)。(2)糖尿病对ApoE-/-小鼠脂肪组织炎症的影响①与正常组相比,糖尿病组ApoE-/-小鼠附睾脂肪组织中促炎Th1和Th17细胞数量均显著增加(P<0.05),抑炎Treg细胞数量显著减少(P<0.05);②与正常组相比,糖尿病组ApoE-/"小鼠附睾脂肪组织中F4/80+巨噬细胞数目和M1/M2巨噬细胞比值均显著增加(P<0.05);③与正常组相比,糖尿病组ApoE—/-小鼠附睾脂肪组织中促炎因子MCP-1、IL-6、TNF-α表达均显著增加(P<0.05),抑炎细胞因子IL-10表达显著增加(P<0.05)。(3)PTPN2过表达对ApoE-/-小鼠脂肪组织功能的影响①与N+Vehicle组相比,DM+Vehicle组ApoE-/—小鼠附睾脂肪组织PTPN2表达显著下降(P<0.05);与DM+Vehicle组相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠附睾脂肪组织PTPN2表达显著增加(P<0.05);②与N+Vehicle组相比,DM+Vehicle组ApoE-/"小鼠附睾脂肪组织重量和附睾脂肪细胞直径均显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠附睾脂肪组织重量和附睾脂肪细胞直径均显著降低(P<0.05);③与N+Vehicle组相比,DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠附睾脂肪组织FASN表达显著增加(P<0.05),ATGL、HSL和Perilipin表达均显著降低(P<0.05);与DM+Vehicle组相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠附睾脂肪组织FASN表达显著降低(P<0.05),ATGL、HSL和Perilipin表达均显著增加(P<0.05)。(4)PTPN2过表达对糖尿病ApoE-/-小鼠附睾脂肪T细胞极化的影响与N+Vehicle组相比,DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠附睾脂肪组织中Treg数目显著减少(P<0.05),Thl和Th17数目显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组相比,DM+PTPN2组ApoE-/"小鼠附睾脂肪组织中Treg数目显著增加(P<0.05),Thl和Th17数目显著减少(P<0.05)。(5)PTPN2过表达对糖尿病ApoE-/-小鼠附睾脂肪巨噬细胞极化的影响与N+Vehicle组相比,DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠附睾脂肪组织中F4/80+巨噬细胞数目和M1/M2比值显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠附睾脂肪组织中F4/80+巨噬细胞数目和M1/M2比值显著减少(P<0.05)。(6)PTPN2过表达对ApoE-/-小鼠脂肪组织局部炎症与系统性炎症的影响①与N+Vehicle组相比,DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠附睾脂肪组织中促炎因子MCP-1、TNF-α和IL-6显著增加(P<0.05),抑炎因子IL-10显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠附睾脂肪组织中促炎因子MCP-1、TNF-α和IL-6显著减少(P<0.05),抑炎因子IL-10显著增加(P<0.05)。②与N+Vehicle组相比,DM+Vehicle组ApoE--小鼠血清中炎症标记物IL-6、IFN-γ、TNF-α、MCP-1和CRP显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠血清中炎症标记物IL-6、IFN-β、TNF-α、MCP-1和CRP 显著减少(P<0.05)。③IPGTT结果显示,与N+Vehicle组相比,DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠IPGTT血糖曲线下面积显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠血清中IPGTT血糖曲线下面积显著降低(P<0.05)。(7)附睾脂肪局部过表达PTPN2抑制糖尿病ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块炎症,增加斑块稳定性①与N+Vehicle组相比,DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块负荷显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块负荷显著减少(P<0.05);②与N+Vehicle组相比,DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠主动脉根部斑块面积、脂质、巨噬细胞和易损指数显著增加(P<0.05),而平滑肌细胞和纤维化显著降低(P<0.05);与DM+Vehicle组相比,DM+PTPN2组ApoE-/"小鼠主动脉根部斑块面积、脂质、巨噬细胞和易损指数显著降低(P<0.05),而平滑肌细胞和纤维化显著增加(P<0.05);③与N+Vehicle组相比,DM+Vehicle组ApoE--小鼠主动脉炎症因子ICAM-1、IL-6、TNF-α和MCP-1显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠主动脉炎症因子ICAM-1、IL-6、TNF-α和MCP-1显著减少(P<0.05)。(8)附睾脂肪局部过表达PTPN2抑制STAT3信号通路与N+Vehicle组相比,DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠附睾脂肪组织P-STAT3/STAT3比值显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠附睾脂肪组织P-STAT3/STAT3比值显著减少(P<0.05)。结论(1)糖尿病状态下,内脏脂肪PTPN2表达减低,诱导内脏脂肪组织T细胞促炎极化,加重脂肪组织局部炎症和系统性炎症,促进易损斑块的形成;(2)PTPN2/STAT3信号通路在内脏脂肪组织T细胞极化过程中起重要作用,可能成为整合2型糖尿病脂肪组织T细胞极化、脂肪组织炎症和易损斑块形成的关键环节。研究背景动脉粥样硬化是一组易感基因和危险因素共同作用导致的血管疾病。糖尿病是动脉粥样硬化最重要的危险因素之一。.鉴于糖尿病在动脉粥样硬化中的重要作用,糖尿病已作为冠状动脉粥样硬化性心脏病的等危症。糖尿病可引起心肌梗死等大血管疾病,也可引起糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)等微血管疾病。糖尿病肾病是糖尿病最为严重的微血管并发症之一,约占终末期肾病病因的45%。一旦糖尿病肾病发展至临床蛋白尿阶段(4期)即无法逆转,故糖尿病肾病的3期治疗是阻止糖尿病肾功能衰竭的最后一道防线。而针对糖尿病相关危险因素的药物仍不能完全阻止糖尿病肾病由3期进入4期。因此,探索3期糖尿病肾病恶化机制的治疗至关重要。代谢紊乱启动的炎症参与3期糖尿病肾病的恶化。3期糖尿病肾病表现为持续性尿白蛋白排泄率在20-200明/min,其组织学特点包括:系膜区基质堆积,肾小球基底膜增厚,小管间质纤维化和肾脏巨噬细胞浸润。研究证实,糖尿病状态下,糖脂代谢紊乱诱导肾小球和肾小管细胞分泌炎症介质,进而导致巨噬细胞浸润、肾脏细胞增殖和细胞外基质堆积,是糖尿病肾功能恶化的重要机制。因此,发现一种能够同时改善代谢和抑制炎症的治疗方法具有重要意义。PTPN2可能是调节代谢、抑制炎症的关键分子。PTPN2是人类基因组编码的38种酪氨酸特异性磷酸酶(PTPs)中的一种,首先从T细胞cDNA库里克隆出来,广泛存在于各种细胞。PTPN2在维持代谢平衡中具有重要作用,肝脏特异性敲除PTPN2可导致肝脂肪变性,肥胖和胰岛素抵抗。同时,PTPN2在炎症和自身免疫疾病的发生发展中具有重要作用,比如克罗恩病、1型糖尿病和类风湿等。尽管这些研宄表明PTPN2在调节代谢和炎症疾病中的重要性,PTPN2在糖尿病肾病中的作用及其下游分子机制尚不清楚。STAT信号通路是高糖和炎症促进慢性肾脏疾病的重要机制,PTPN2是STAT信号通路的关键负调控分子。因此,PTPN2可能通过STAT信号通路抑制肾脏炎症,减轻肾脏损伤和纤维化。为了研究PTPN2对糖尿病小鼠代谢与肾脏微炎症的影响,我们构建2型糖尿病ApoE-/-小鼠模型,体内应用PTPN2腺病毒过表达,检测PTPN2对小鼠代谢、炎症因子表达、巨噬细胞浸润、极化及信号通路的影响,探讨在糖尿病状态下,PTPN2可能通过调节代谢紊乱和肾脏微炎症,改善肾损伤和纤维化。研究目的(1)建立2型糖尿病肾病小鼠模型;(2)体内体外实验探讨PTPN2/STAT信号通路在糖尿病肾病小鼠中的作用。实验方法(1)动物实验:100只4周龄雄性ApoE-/-小鼠,行IPGTT后随机分为普通饮食组(n=50)和糖尿病组(n=50),糖尿病组给予高脂饮食喂养,6周后,再行IPGTT;出现胰岛素抵抗的小鼠一次性腹腔注射小剂量链脲佐菌素75mg/kg,2周后再行IPGTT,将随机血糖≥11.1mmol/L的小鼠纳入2型糖尿病组;(2)实验动物分组:小鼠20周龄时,将对照组分为对照+空载体组、对照+PTPN2过表达组,将糖尿病组分为糖尿病+PTPN2空载体组、糖尿病+PTPN2过表达组;(3)IPGTT试验:小鼠禁食12小时,腹腔注射葡萄糖1.5g/kg,然后于0min、15min、30min、60min和120min分别断尾取血检测血糖;(4)ApoE-/-小鼠鼠体重的监测:定期监测小鼠体重的变化;(5)肾脏微炎症检测:通过Western Blot和免疫组织化学染色的方法检测肾脏组织内巨噬细胞总量(F4/80)、Ml型巨噬细胞(ArgⅡ)、M2型巨嗟细胞(ArgⅠ),计算巨噬细胞M1/M2的比值;通过免疫组织化学染色的方法检测肾脏组织内促炎症因子单核细胞趋化因子1(MCP-1)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子a(TNFa)及白介素6(IL-6)的表达;(6)肾脏纤维化检测:对小鼠肾脏组织分别进行HE,Massom天狼星红染色进行肾脏组织胶原定量。通过Western Blot和免疫组织化学染色的方法检测肾脏组织内胶原I(Col)、胶原IV(Co IV)、纤维连接蛋白(Fn)、I型纤溶酶原激活物抑制因子(PAI-1)及转化生长因子(TGF-P)的表达;(7)STAT信号通路检测:通过Western Blot和免疫组织化学染色的方法检测肾脏组织内PTPN2及STAT信号通路的表达;(8)血管新生检测:通过Western Blot和免疫荧光的方法检测肾脏组织内CD31及血管内皮生长因子(VEGF)的表达;(9)体外实验:在体外模拟高糖血症状态,PTPN2过表达腺病毒转染肾小球系膜细胞和肾小管上皮细胞24小时后,分别行低糖或高糖刺激4小时,提取蛋白,观察PTPN2过表达对STAT信号通路、STAT下游分子及肾小球系膜细胞增殖的影响。实验结果(1)1.建立2型糖尿病ApoE-/-小鼠早期糖尿病肾病模型①EPGTT实验显示,4周龄ApoE-/-小鼠,对照组与糖尿病组血糖水平无明显差异(P>0.05);10周龄ApoE-/-小鼠,与对照组相比,糖尿病组在15min、30min、60min及120min血糖水平显著增加,血糖曲线下面显著增加(P<0.05);12周龄ApoE-/-小鼠,与对照组相比,糖尿病在0min、15min、30min、60min及120min血糖水平显著增加,血糖曲线下面积显著增加(P均<0.05);②与对照组ApoE-/-、鼠相比,糖尿病ApoE-/-小鼠在10周龄、20周龄、22周龄及24周龄时体重显著増加(P<0.05);③与对照组ApoE-/-小鼠相比,糖尿病ApoE-/-小鼠血清肌酐水平、血清尿素氮水平和尿蛋白水平显著增加(P<0.05);④与对照组ApoE-/-小鼠相比,糖尿病ApoE-/-小鼠肾小球体积显著增大(P<0.05),PAS+系膜基质堆积显著增加(P<0.05)。⑤与对照组ApoE-/-鼠相比,糖尿病ApoE-/-小鼠肾PTPN2表达显著下降(P<0.05)⑥与对照组ApoE-/-小鼠相比,糖尿病ApoE-/-、鼠肾P-STAT1/STAT1和P-STAT3/STAT3比值显著增加(P<0.05)。(2)PTPN2基因治疗改善糖尿病ApoE-/-肾损伤①与N+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠血清肌酐、血清尿素氮和尿蛋白水平显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠血清肌酐、血清尿素氮和尿蛋白水平显著降低(P<0.05);②与N+Vehicle组ApoF-/-小鼠相比,DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠肾小球体积和系膜基质堆积显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠肾小球体积和系膜基质堆积显著降低(P<0.05)。(3)PTPN2基因治疗改善糖尿病ApoE-/-小鼠胰岛素抵抗和代谢紊乱①与N+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+Vehicle缉ApoE-/-小鼠糖耐量曲线下面积和空腹血糖水平显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠糖耐量曲线下面积和空腹血糖水平显著降低(P<0.05);②与N+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠总胆固醇、LDL-C、HDL-C-C和甘油三酯显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组ApoE-/-、鼠相比,DM+PTPN2组ApoE-/-、鼠总胆固醇、LDL-C、HDL-C-C和甘油三酯显著降低(P<0.05);③与N+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠ALT、AST以及肝指数显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠ALT、AST以及肝指数显著降低(P<0.05);④与N+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠肝细胞空泡数目和肝纤维化显著增加与DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠肝细胞空泡数目和肝纤维化显著降低(P<0.05)。(4)PTPN2基因治疗减轻肾脏微炎症①免疫组织化学结果显示,与N+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠肾小球和肾小管间质区域CD3+T细胞和F4/80+巨噬细胞显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠肾小球和肾小管间质区域CD3+T细胞和F4/80+巨噬细胞显著降低(P<0.05);②与N+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+Vehicle组ApoE-/-、鼠M1/M2型巨噬细胞比值显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠M1/M2型巨噬细胞比值显著减少(P<0.05);③Western blot结果显示,与N+Vehic〗e组ApoE-/-小鼠相比,DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠粘附因子ICAM-1,促炎因子TNF-a和IL-6,趋化因子MCP-1显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组ApoEv-/-小鼠相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠粘附因子ICAM-1,促炎因子TNF-a和IL-6,趋化因子MCP-1显著降低(P<0.05)。(5)PTPN2基因治疗减轻肾脏纤维化①与N+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠肾小球和肾小管间质纤维化显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+PTPN2组ApoE孚小鼠肾小球和肾小管间质纤维化显著降低(P<0.05);②与N+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠促纤维化因子Coll、ColIV、Fn、PAI-I和TGF-p表达显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠促纤维化因子Col I、ColIV、Fn、PAI-1和TGF-p表达显著降低(P<0.05)。(6)PTPN2基因治疗抑制STAT信号通路与N+Vehicle组ApoEA小鼠相比,DM+Vehicle组ApoE-/-、鼠肾脏PTPN2表达显著减少(P<0.05),P-STAT1和P-STAT3表达显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+PTPN2组ApoE-/-小鼠肾脏PTPN2表达显著增加(P<0.05),P-STAT1和P-STAT3表达显著减少(P<0.05)。(7)PTPN2基因治疗减轻肾脏血管新生与N+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠肾脏VEGF和CD31表达显著增加(P<0.05);与DM+Vehicle组ApoE-/-小鼠相比,DM+PTPN2组ApoE-/-、鼠肾脏VEGF和CD31表达显著减少(P<0.05)。(8)高糖抑制肾小球系膜细胞和肾小管上皮细胞PTPN2的表达,激活STAT信号通路①免疫细胞荧光显示,与低糖组相比,高糖处理24小时后,肾小球系膜细胞和肾小管上皮细胞PTPN2表达明显减少(P<0.05);②与低糖组相比,高糖时间依赖性的抑制肾小球系膜细胞和肾小管上皮PTPN2的表达(P<0.05);与低糖组相比,高糖时间依赖性的激活肾小球系膜细胞和肾小管上皮细胞中的STAT1/3信号通路(P<0.05)。(9)PTPN2过表达抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞和肾小管上皮细胞STAT激活,STAT下游靶基因的表达和细胞增殖①在肾小球系膜细胞和肾小管上皮细胞中,同LG+Vehicle组相比,HG+Vehicle组STAT1/3磷酸化水平显著增加(P<0.05);同HG+Vehicle组相比,HG+PTPN2组STAT1/3磷酸化水平显著降低(P<0.05);②在肾小球系膜细胞和肾小管上皮细胞中,同LG+Vehide组相比,HG+Vehicle组STAT信号通路下游的粘附因子ICAM-1,促炎因子TNF_a、IL-6和促纤维化因子Col I,Col IV,Fn,PAI-l,TGF-p的表达水平显著增加(P<0.05);同HG+Vehicle组相比,HG+PTPN2组STAT信号通路下游的粘附因子ICAM-1,促炎因子TNF-a、IL-6和促纤维化因子Coll,ColIV,Fn,PAI-1,TGF-|3的表达水平显著降低(P<0.05)。结论(1)高脂饮食加小剂量STZ诱导的糖尿病小鼠出现蛋白尿,系膜基质增生,肾小管间质纤维化和巨噬细胞浸润,呈现明显的肾脏损伤;(2)糖尿病小鼠肾脏PTPN2表达明显下降,同时伴随着STAT信号通路明显激活和STAT下游促炎和促纤维化因子的表达增加;(3)PTPN2基因治疗不仅改善了糖尿病小鼠的高糖血症和代谢紊乱,而.且通过抑制肾脏微小炎症的发生改善肾脏损伤。