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研究目的近年来,越来越多的研究认为炎症作用机制在糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy DR)的早期发展中发挥着不可或缺的作用。由此推测,抗炎治疗有可能成为预防DR的发展及治疗提供一个新的思路。石斛作为我国传统名贵中草药之一,被认为具有滋阴补肾、清肝明目的功能。多糖是石斛的主要的药用活性成分之一,其化学成分和药理活性作用也日益引起人们的关注,研究表明,石斛多糖具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等作用。本研究以糖尿病大鼠为研究对象,观察石斛多糖与糖尿病大鼠血-视网膜屏障功能的关系及其具体的作用机制。实验方法动物实验:老鼠随机分为5组,进行实验:(1)正常组,(2)糖尿病组,(3)糖尿病+石斛多糖低剂量组[100mg/(kg?天)],(4)糖尿病+石斛多糖中剂量组[200mg/(kg?天)],(5)糖尿病+石斛多糖高剂量组[300mg/(kg?天)]。老鼠按照55mg/kg使用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射,正常组组大鼠腹腔注射同等剂量柠檬酸钠溶液,以后每周监测血糖一次。48小时血糖高于16.7mmol/L认为造模成功。建模成功6周后,石斛多糖各处理组进行为期8周灌胃治疗。8周后,2%戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔麻醉大鼠,取所需标本。采用蛋白印迹法(Westen Blot)检测大鼠视网膜内白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumer factor-alpha,TNF-α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及视网膜内紧密连接蛋白家族(ZO-1、Occludin、Claudin-5)的蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测大鼠血清、视网膜内IL-6、TNF-α的含量,免疫组化观察大鼠视网膜内核转录因子κB(NF-κB)的表达水平,伊凡氏蓝(Evans blue)染色分析糖尿病大鼠血视网膜屏障功能。实验结果与正常组比较,糖尿病组大鼠视网膜内IL-6、TNF-α、VEGF的蛋白表达增加,紧密连接蛋白(ZO-1、Occludin、Claudin-5)表达水平降低,血清IL-6、TNF-α表达增加,大鼠视网膜渗透量增高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与糖尿病组比较,石斛多糖低、中、高各剂量组大鼠视网膜内IL-6、TNF-α的蛋白表达明显降低,紧密连接蛋白(ZO-1、Occludin、Claudin-5)表达水平增高,血清IL-6、TNF-α的表达降低,石斛多糖各剂量组大鼠视网膜渗透量明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。石斛多糖各剂量组之间各指标两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。免疫组化切片观察,正常大鼠视网膜未见明显NF-κB阳性染色,糖尿病组大鼠视网膜内NF-κB表达高于正常组,与糖尿病组比较,石斛多糖各剂量组NF-κB表达降低。结论石斛多糖可以降低糖尿病视网膜病变大鼠体内炎症因子(IL-6、TNF-α)的表达,进而抑制VEGF表达上调并改善糖尿病大鼠血-视网膜屏障(blood-retinal barrier,BRB)的通透性。其作用机制可能与NF-κB通路有关。