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内生菌广泛存在于自然界的植物中,能够生成与宿主的成分结构相同或者相似的二级代谢产物,因此内生菌已成为天然药物的重要来源之一。研究发现,药(食)用植物内生菌的胞外多糖具有许多重要生理活性,如抗肿瘤、免疫调节、抗氧化、杀菌等。本论文以石榴叶子内生真菌枫香拟茎点霉菌NJUSTb1为研究对象,对其胞外多糖进行了提取、分离、纯化、结构鉴定、化学修饰、体外免疫调节活性研究和吸湿保湿性能研究。主要研究结果如下:1.大量发酵内生真菌NJUSTb1,将发酵液离心后收集上清液,加入4倍体积乙醇后得到的沉淀用Sevage法除去蛋白质,减压浓缩至合适体积后透析,冻干,最终得到粗多糖EPS,得率为900 mg/L;EPS使用葡聚糖凝胶Sephadex G-200进行纯化后得到两个组分,分别命名为EPS-1和EPS-2,由于EPS-2的含量非常低(小于4%),所以本论文只对EPS-1进行结构分析和潜在的活性评价;EPS-1分子量为343 kDa;组成成分分析表明EPS的总糖含量为95.98%,蛋白含量为0.65%,不含糖醛酸;EPS-1的总糖含量为98.66%,蛋白含量为0.19%,糖醛酸含量为0。2.利用光谱、化学等多种方法分析了EPS-1的结构。紫外扫描结果显示粗多糖EPS和多糖组分EPS-1都不含有核酸;单糖组成分析结果表明EPS-1主要由葡萄糖组成,含有微量的甘露糖和半乳糖;红外光谱分析表明EPS-1具备多糖的特征吸收峰;甲基化反应、高碘酸氧化、Smith降解、GC-MS和NMR分析表明EPS-1主要是由→4)–α-D-Glcp-(1→6)-α-D-Glcp-(1→4)-α-D-Glcp-(1→4)-α-D-Glcp-(1→结构单元组成;扫描电镜表明EPS-1为丝状的连续体,堆积较为散乱,并伴有球状散落在丝状多糖上;刚果红反应的结果表明多糖EPS-1不含三股螺旋结构。3.分别采用氯磺酸-吡啶法和溶媒法对多糖EPS-1进行硫酸化和羧甲基化结构修饰,得到了蓝色的硫酸化多糖S-EPS1和白色的羧甲基化多糖C-EPS1;红外光谱结果表明成功对多糖进行了硫酸化修饰和羧甲基化修饰,S-EPS1和C-EPS1的基团取代度分别为1.228和0.903。体外免疫调节实验表明,当浓度为31.25-500μg/mL时,EPS、S-EPS1和C-EPS1能够显著提高RAW 264.7细胞的增殖作用;EPS-1对细胞活力没有影响。在一定浓度范围内,EPS能显著促进NO、TNF-α和IL-6的产生,并且表现出浓度依赖关系;当浓度为31.25-500μg/mL时,EPS-1、S-EPS1和C-EPS1对NO和IL-6的产生没有影响;在浓度为250μg/mL和500μg/mL时,EPS-1能显著促进TNF-α的产生;当浓度为500μg/mL时,S-EPS1和C-EPS1能显著促进TNF-α的产生。多糖的吸湿保湿性能研究结果表明,S-EPS1和C-EPS1比EPS-1的吸水性能好,S-EPS1的保湿性高于EPS-1,硫酸化修饰提高了多糖EPS-1的吸湿保湿能力。