人参丹参有效组分配伍抗动脉粥样硬化作用机制研究

来源 :长春中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wzhqch
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目的:心血管疾病(cardiovascular disease,CVD)是世界上发病率和病死率较高的疾病之一。动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是导致CVD的重要病理基础。人参丹参是中医治疗CVD的常用药对之一,临床和动物实验研究表明二者配伍在防治AS上具有较好的疗效。为了更好的阐释人参丹参配伍的内涵和作用机制,本研究拟从人参丹参组分配伍入手,建立AS体外模型,筛选人参丹参抗AS的有效组分;另一方面,对有效组分进行化学成分定性定量分析,以网络药理学和预测作用机制。方法:采用HPLC法对乙醇提取和水煎煮提取的人参丹参药对与单味药材中主要化学成分进行了定性定量分析;基于网络药理学预测人参丹参抗AS作用机制;采用MTT法对过氧化氢(H2O2)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)建立体外心肌细胞氧化应激损伤模型检测细胞存活率。结果:采用HPLC法对人参丹参合煎液中的化学成分进行定性分析,检测出人参皂苷类成分:人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2、Rd;丹酚酸类成分:丹参素、迷迭香酸、丹酚酸B和丹酚酸A;并对其中人参皂苷Rg1、Re、Rb1、丹酚酸B及迷迭香酸进行了定量分析。利用网络药理学方法,针对已报道的人参丹参活性成分,采用TCMID数据库筛选出预测人参丹参活性成分靶标,并通过Drug Bank,OMIM,TTD等数据库筛选出FDA批准的治疗冠心病靶标。通过对靶标的KEGG通路富集分析,采用Cytoscape软件构建人参丹参“成分-靶标-疾病”网络。网络分析表明,预测出117个成分、25个靶标蛋白和11条通路与冠心病相关。推测上述有效组分的主要作用靶位为内皮细胞、炎性细胞及血小板等。采用体外Ox-LDL,H2O2诱导人脐静脉血管内皮细胞及RAW264.7巨噬细胞损伤模型评价人参丹参合煎液的保护作用,实验结果表明不同溶剂提取人参丹参药对及单味药材均可提高HUVEC细胞存活率(P<0.05或P<0.01),并呈一定的剂量依赖性。结论:综上所述,本论文从人参丹参组分配伍入手,建立AS体外模型,在此基础上筛选人参丹参抗AS的有效组分;另一方面,对有效组分进行化学成分定性定量分析,以网络药理学预测作用机制。以上结果在一定程度上揭示了人参丹参配伍的内涵,为二者在临床的合理应用奠定了基础。
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