【摘 要】
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目的:探讨中药红曲提取物红曲素对HepG2细胞脂质代谢的影响,观察其调节脂质代谢过程是否通过激活LXR/SREBP/FAS通路,发挥调脂作用。材料与方法:取对数生长期的HepG2细胞,建立体外高脂模型,经不同药物浓度红曲素（5u M,10u M,15u M,30u M,50u M,80u M,100u M）干预48h后,用MTT法检测红曲素对HepG2细胞增殖的影响;经不同药物浓度红曲素（5u M
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目的:探讨中药红曲提取物红曲素对HepG2细胞脂质代谢的影响,观察其调节脂质代谢过程是否通过激活LXR/SREBP/FAS通路,发挥调脂作用。材料与方法:取对数生长期的HepG2细胞,建立体外高脂模型,经不同药物浓度红曲素（5u M,10u M,15u M,30u M,50u M,80u M,100u M）干预48h后,用MTT法检测红曲素对HepG2细胞增殖的影响;经不同药物浓度红曲素（5u M,10u M,15u M）干48h后,用流式细胞术检测红曲素对HepG2细胞凋亡的影响;经不同药物浓度红曲素（5u M,10u M,15u M）干预48h,用油红“O”染色法染色后,电子显微镜下观察HepG2细胞的脂质表达;经Western Blot法检测红曲素作用于HepG2细胞48h后,LXR、SREBP-lc、FAS、PPAR-α、CPT-1、ACO蛋白的表达;经PCR法检测HepG2细胞中LXR、HMG-Co A、SREBP-lc、FAS、PPAR-α、CPT-1、ACO等因子的mRNA表达。结果:1.MTT法结果提示:通过不同药物浓度的红曲素（0u M,5u M,10u M,15u M,30u M,50u M,80u M,100u M）干预48h后,细胞存活率为98.50%、96.52%、96.41%、95.64%、90.54%、74.73%、57.51%、47.36%。提示0u M,5u M,10u M,15u M红曲素干预48h后对HepG2细胞存活率无显著影响,而30u M,50u M,80u M,100u M红曲素则可显著降低HepG2细胞的存活率,差异有统计学意义。（P＜0.05）。2.流式细胞术结果提示:通过不同药物浓度的红曲素（0u M,5u M,10u M,15u M）干预48h后,总细胞群中凋亡细胞百分比分别为8.8±1.17%、5.4±2.32%、6.2±1.87%、6.6±1.64%。提示上述红曲素浓度不会诱导HepG2细胞发生凋亡（P＞0.05,差异无统计学意义）。3.油红“O”染色结果提示:红曲素能明显减少HepG2细胞脂质积累。4.Western Blot法结果提示:红曲素下调了LXR、SREBP-lc、FAS蛋白表达水平,上调了PPAR-α、CPT-1、ACO蛋白表达水平。（P＜0.05,有统计学差异。）5.PCR技术检测结果提示:红曲素下调了LXR、SREBP-lc、FAS、HMG-Co A mRNA表达水平,上调了PPAR-α、CPT-1、ACO mRNA表达水平。（P＜0.05,有统计学差异。）结论:1.红曲素作用于HepG2细胞,可使LXR、SREBP-lc、FAS蛋白及mRNA表达水平下调,说明红曲素可能是通过抑制LXR/SREBP/FAS通路,从而抑制了脂肪酸的生成。2.红曲素作用于HepG2细胞也下调了HMGCR mRNA表达水平,说明红曲素可能是通过抑制胆固醇的生成,以发挥调脂作用。3.红曲素作用于HepG2细胞使PPAR-α、CPT-1、ACO蛋白及mRNA表达水平上调,说明红曲素可能通过激活PPARs、CPT-1、ACO等因子,促进脂肪酸β氧化,从而发挥降脂作用。
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