背景和目的：慢性病毒感染后，CD8T细胞增殖分化成为病毒特异性的效应CD8T细胞，由于慢性病毒持续存在，效应CD8T细胞免疫功能逐渐降低，增殖能力下降，细胞存活率下降，并且不能分化形成记忆性CD8T细胞，这一现象已经被学术界广泛研究发现，并且称此为T细胞功能耗竭,大部分发生在慢性感染和肿瘤中。目前关于CD8T细胞功能耗竭的机制尚不完全清楚。我们的前期研究结果显示，表观遗传修饰在记忆性CD8T细胞的分化形成以及功能发挥中具有重要作用。因此本研究中，我们将首次从表观遗传修饰角度探讨慢性病毒感染中CD8T细胞功能耗竭的分子调控机制，重点是组蛋白乙酰化调控与病毒慢性感染中功能耗竭性CD8T细胞的关系，从而以此为理论基础进一步研究延缓或者逆转慢性病毒感染后CD8T细胞功能的耗竭。方法：利用淋巴细胞行脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitisvirus-LCMV)不同病毒株感染小鼠建立小鼠感染模型：急性病毒株LCMV-Arm（Arm）感染小鼠建立急性感染，LCMV-clone13（Cl-13）感染小鼠建立慢性感染。通过与Arm急性病毒感染比较，分析Cl-13慢性感染过程中，病毒特异性CD8T细胞组蛋白乙酰化的表达特点、功能意义及与疾病进展的关系，从表观遗传学角度分析慢性感染中抗原特异性CD8T细胞免疫功能耗竭的分子机制。应用四聚体染色技术检测表位特异性CD8T细胞的频率；流式细胞仪检测病毒特异性CD8T细胞的表型特征；体外多肽刺激淋巴细胞，流式细胞仪检测CD8T细胞产生细胞因子的能力；流式细胞染色以及染色质免疫共沉淀(chromatinimmunoprecipitation, ChIP）实验研究CD8T细胞组蛋白乙酰化表达水平；体内和体外实验探讨组蛋白乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠（valproic acid sodium,VPA）是否可以逆转耗竭性CD8T细胞的免疫功能；流式细胞染色和实时定量PCR检测VPA处理后CD8T细胞的功能状态；细胞过继转移实验研究VPA体外处理后的功能耗竭性CD8T细胞是否可以在体内存活并且发挥更强的免疫功能。结果：1)与Arm急性致病病毒株比较，Cl-13慢性病毒株感染小鼠后，病原特异性CD8T细胞免疫功能逐渐降低，分泌细胞因子IFN-γ, TNF-α以及IL-2能力下降，并最终进入耗竭状态。2) Cl-13感染中，流式细胞仪染色分析显示，病毒特异性CD8T细胞组蛋白乙酰化水平在感染初期高表达，随着感染的进程，逐渐低表达。ChIP结果显示，在慢性病毒感染初期，ifng-promoter和ifng-enhancer两基因位点结合更多乙酰化的组蛋白；在功能耗竭期，两基因位点结合乙酰化的组蛋白水平显著降低。3) Cl-13感染中，不仅病毒特异性CD8T细胞功能耗竭，整体CD8T细胞免疫功能也下降，表现为分泌细胞因子的能力降低，并且整体CD8T细胞组蛋白乙酰化水平也降低。4)体外VPA处理耗竭性CD8T细胞后，其组蛋白乙酰化水平升高，分泌IFN-γ等细胞因子的能力提高。5)体外VPA处理后的耗竭性CD8T细胞过继转移入正常小鼠体内后，存活率升高，并且分泌细胞因子能力升高，表明这群细胞免疫功能增强，成为具有功能的记忆性CD8T细胞。6)体内VPA治疗Cl-13病毒感染后小鼠，病毒特异性CD8T细胞组蛋白乙酰化水平升高，耗竭性CD8T细胞延缓形成。7)体内或者体外VPA处理耗竭性CD8T细胞后，ChIP实验结果显示，ifng-promoter和ifng-enhancer两基因位点结合乙酰化的组蛋白水平显著升高。结论：Cl-13慢性病毒株感染后，CD8T细胞免疫功能渐进性耗竭；Cl-13感染过程中CD8T细胞功能缺陷与其不能进行必需的组蛋白乙酰化重塑有关；慢性感染过程中CD8T细胞功能缺陷可以通过增加组蛋白乙酰化而得以逆转。本研究首次从表观遗传学角度阐明了病毒慢性感染后CD8T细胞功能耗竭的机制，从而为病毒慢性感染的免疫调节治疗提供理论基础与实验依据。