【摘 要】
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第一部分为探讨干细胞微环境治疗帕金森疾病的可行性及可能机制。方法:实验分四组,以单独培养的SH-SY5Y细胞为空白对照组（SH组）;SH-SY5Y与ES按3:1比例间接共培养组（SE组）;SH-SY5Y与ES按3:1共培养后加MPP+化疗药（SEM组）;SH-SY5Y加MPP化疗药阳性对照组（SM组）;四组均于培养72h后收获SH-SY5Y细胞,分别行细胞增殖实验、细胞凋亡实验、活性氧检测、实时定
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第一部分为探讨干细胞微环境治疗帕金森疾病的可行性及可能机制。方法:实验分四组,以单独培养的SH-SY5Y细胞为空白对照组（SH组）;SH-SY5Y与ES按3:1比例间接共培养组（SE组）;SH-SY5Y与ES按3:1共培养后加MPP+化疗药（SEM组）;SH-SY5Y加MPP化疗药阳性对照组（SM组）;四组均于培养72h后收获SH-SY5Y细胞,分别行细胞增殖实验、细胞凋亡实验、活性氧检测、实时定量反转录聚合酶链式反应（quantitative real-time RT-PCR,qPCR）、蛋白质免疫印迹实验（Western Blot,WB）,研究胚胎干细胞对SH-SY5Y胶质瘤细胞生物学功能和JNK/P53/Bax信号通路的影响,比较各组间差异。结果:ESc微环境促进MPP+诱导损伤的SH-SY5Y细胞凋亡进展,加速SH-SY5Y细胞死亡。ES与SH-SY5Y共培养组活性氧（ROS）表达明显增加,且凋亡相关蛋白JNK、P53、Bax表达增加。结论:ESc可以通过JNK/P53/Bax通路促进SH-SY5Y细胞凋亡,具有治疗神经母细胞瘤的潜能。第二部分研究目的:探讨胚胎干细胞微环境降低人胶质瘤恶性程度的可能机制及治疗方法。研究方法:选择神经系统最常见的恶性肿瘤细胞系,胶质瘤母细胞系（U118）,实验总共分为四组,以单独培养的胶质瘤细胞（U118）为空白对照组（GB）;U118与ES按3:1比例直接混合共培养组（GE）;U118与ES按3:1共培养后加PI3K激动剂（GA）;U118加替莫唑胺化疗药阳性对照组（GT）;四组均于培养72h后收获U118细胞,分别行细胞增殖实验、细胞凋亡实验、活性氧检测、微血管生成拟态实验、实时定量反转录聚合酶链式反应（quantitative real-time RT-PCR,qPCR）、蛋白质免疫印迹实验（Western Blot,WB）研究胚胎干细胞对U118胶质瘤细胞生物学功能和PI3K/AKT信号通路的影响,比较各组间差异。结果:GE共培养组及化疗药物对照组与空白对照组GB相比,共培养组及化疗药物组细胞增殖能力均减弱、凋亡增多、活性氧增多、血管生成拟态形成减少甚至消失,促进肿瘤增生蛋白如Cyclin B、Cyclin D明显减少,而促进肿瘤细胞凋亡及抑制增生的相关蛋白如BAX、BCL-2、P53、Caspase3和Gsk-3B、P21、P27的表达明显增多,有明显统计学差异,PI3K/AKT通路中正性调节因子PI3K、PDK、AKT、mTOR等表达减少,负性调控因子PTEN表达增多,差异均有统计学意义;而加PI3K激动剂组（GA）较共培养GE组正性调节因子表达增多且负性调节因子减少,差异有统计学意义。结论:胚胎干细胞微环境通过下调PI3K/AKT信号通路、抑制肿瘤细胞增殖、抑制蛋白合成、促进肿瘤细胞凋亡,降低胶质瘤恶性程度。
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