论文部分内容阅读
目的通过影像学(X-ray、Micro-CT)、组织病理学(ABH染色、免疫组织化学染色)和骨形态计量学、分子生物学(qPCR)等联合观察分析补肾活血方干预骨折愈合的作用,探究其可能的机制。方法选用正常C57小鼠100只,雄性,体重为20～22±2g,在无菌条件下对小鼠实施胫骨开放性骨折术,经X线胫骨正侧位片筛选后,剔除不合格小鼠,补充至实验需要数量,随机分为补肾活血组、对照组,各组依据5个不同时间点再随机分为5组。术后补肾活血组给予补肾活血方,对照组给予同体积生理盐水。分别于造模后第4天、7天、10天、14天、21天记录小鼠体重变化、活动能力评分,并通过X线、Micro-CT、组织病理学和形态计量学、分子生物学等手段综合评估补肾活血方干预小鼠骨折愈合的作用。结果1.X线结果显示:骨折线模糊程度补肾活血组和对照组之间在术后第14、21天差异显著(P<0.05)。2.骨性骨痂体积比在术后第7、10、14天补肾活血组均显著高于对照组(P<0.05)。3.骨痂骨量在术后第7、10、14天补肾活血组显著优于对照组(P<0.05)。4.骨性骨痂面积比例在术后第7、10、14、21天补肾活血组显著高于对照组(P<0.05)。5.软骨骨痂面积比例在术后第7天补肾活血组显著优于对照组(P<0.05)。6.补肾活血组小鼠体重、活动能力的恢复均快于对照组。7.补肾活血组小鼠的Sox9基因和Col2a1基因的表达集中在术后第7、10天,有统计学差异(p<0.05);Col10a1基因在术后第7、10天的表达水平增高显著,有统计学差异(p<0.05);Runx2基因表达水平在术后的第10天集中,补肾活血组明显高于对照组(p<0.05);Osteocalcin基因的表达水平在第7、10、14、21天补肾活血组小鼠均高于对照组小鼠,其中第10、14天表达较为集中增高显著,有统计学差异(p<0.05);Tgfbr2基因的表达水平在术后第7、10、14天补肾活血组显著高于对照组,有统计学差异(p<0.05)。8.补肾活血组小鼠术后第4天pSmad2蛋白水平上调,较对照组有明显差异(P<0.05)。结论1.补肾活血方在小鼠开放性胫骨骨折愈合过程中有一定地促进作用,一定程度上缩短了骨折愈合的时间。2.补肾活血方可以促进骨折愈合的机制可能与其上调了 Smad2磷酸化水平,从而一定程度上激活了 TGF-β信号有关。