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目的:缺血性脑血管疾病是临床常见病、多发病，其致死率和致残率高，严重威胁人类的健康。脑缺血后的血流恢复在某些情况下能导致进一步的组织损伤和功能障碍，这种恢复血流灌注后的有害情况称脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia-reperfusion injury, CIRI）。抑制缺血再灌注损伤成为目前治疗缺血性脑血管病的关键环节。国内外研究一致认为CIRI的发生机制复杂，现代研究表明其发生主要与钙超载、兴奋性氨基酸毒性、氧化应激反应、脑水肿和细胞凋亡基因被激活等有关。其中能量代谢障碍则被认为是缺血再灌注后细胞损伤的始动环节，代谢性毒素引发的连锁反应是核心环节，细胞内Ca2+超载是导致神经元死亡的最后通路。由于目前临床上用于抑制CIRI的西药主要是干预CIRI某一环节或某一途径的药物，作用有限，而中医具有整体观和辨证论治的特点，以及中药多通路多靶点特性，所以近年来中药尤其是中药复方的脑保护作用成为CIRI研究的重要内容。临床上导师常用化浊解毒、活血通络法治疗缺血性脑卒中恢复期、血管性痴呆等，对神经功能修复甚为有效，但对脑缺血再灌注损伤是否有保护作用尚缺乏实验研究支持。本实验拟观察化浊解毒、活血通络方对脑缺血再灌注损伤小鼠脑组织Ca2+-ATP酶及Na+-K+-ATP酶活性、脑组织谷氨酸（Glu）含量以及血清钙调磷酸酯酶（CaN）含量的影响，同时观察化浊解毒、活血通络方对脑缺血再灌注损伤模型小鼠脑组织病理形态学的影响，并深入探讨化浊解毒、活血通络方对CIRI模型小鼠钙超载相关机制的影响，为临床应用提供依据。方法：实验采用双侧颈总动脉夹闭的方法制备急性脑缺血再灌注损伤小鼠模型。健康雄性昆明小鼠50只，随机分为假手术组、模型组、尼莫地平对照组（文中简称为“尼莫地平组”），化浊解毒、活血通络方低剂量组（文中简称为“低剂量组”），化浊解毒、活血通络方高剂量组（文中简称为“高剂量组”）5组，每组10只（n=10）。假手术组小鼠仅分离双侧颈总动脉，穿线但不结扎，其余各组小鼠均用微型动脉夹结扎双侧颈总动脉，阻断血流，制备脑缺血再灌注损伤模型。于手术后第2天开始用药治疗。假手术组和模型组均以生理盐水灌服，尼莫地平组予尼莫地平液灌服，高剂量组和低剂量组灌服化浊解毒、活血通络方中药液（化浊解毒、活血通络方由当归、丹参、赤芍、石营蒲、郁金、地龙、益智仁、云苓、泽泻、川芎、黄连等中药组成，实验室水煎浓缩）。各组小鼠分别于术后14d断头处死，取左侧脑组织固定后切片，HE染色，光镜下观察脑组织的形态变化。取右侧大脑皮层组织制成匀浆，离心后取上清液，进行脑组织Ca2+-ATP酶及Na+-K+-ATP酶活性的测定及脑组织谷氨酸（glutamic acid, Glu）含量测定。于小鼠断头同时取血，测定血清钙调神经磷酸酶（CaN）含量。实验所得数据应用SPSS13.0统计分析软件进行统计学分析，数据用均数±标准差（x±s）表示，统计方法采用方差分析、Dunnett’T3检验。显著性差异水平以0.05,0.01为标准。结果：1各组小鼠脑组织海马锥体细胞的病理形态变化：光镜下依次观察五组小鼠脑组织海马区的病理形态学变化，可见“假手术组”小鼠海马区锥体细胞排列整齐，层次紧密，细胞核圆而大，核仁清晰：“模型组”小鼠海马组织呈现缺血性病理改变，锥体细胞脱失明显，排列紊乱，层次疏松，细胞核固缩，结构模糊。相对而言，各用药组小鼠海马区锥体细胞病变比模型组均有所改善，以“高剂量组”改善最为显著。2各组小鼠脑组织Ca2+-ATP酶及Na+-K+-ATP酶含量的测定结果：与假手术组相比，模型组小鼠脑组织中Ca2+-ATP酶及Na+-K+-ATP酶活性明显减弱（P<0.01）。与模型组比较，各用药组小鼠脑组织中Ca2+-ATP酶及Na+-K+-ATP酶活性明显增强（P<0.01）。且高剂量组的Ca2+-ATP酶及Na+-K+-ATP酶活性高于低剂量组及尼莫地平组（P<0.01），低剂量组及尼莫地平组间比较，差异无统计学意义（P>0.05）。3各组小鼠脑组织谷氨酸含量的测定结果：模型组小鼠脑组谷氨酸明显高于假手术组（P<0.01）；各用药组均低于模型组（P<0.01）；用药各组之间比较:高剂量组的谷氨酸含量低于尼莫地平组及低剂量组（P<0.01），低剂量组与尼莫地平组相比较，差异无统计学意义（P>0.05）。4各组小鼠血清钙调神经磷酸酶（C aN）含量的测定结果：模型组小鼠血清钙调神经磷酸酶（CaN）含量明显高于假手术组（P<0.01）；各用药组均低于模型组（P<0.01）；用药各组之间比较：高剂量组的血清钙调神经磷酸酶（CaN）含量低于尼莫地平组及低剂量组（P<0.01），低剂量组与尼莫地平组相比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论：1采用夹闭双侧颈总动脉法制备CIRI模型小鼠，术后经神经病理学证实小鼠海马锥体细胞受损,说明造模成功。2化浊解毒、活血通络方可改善小鼠海马区的神经细胞形态学表现，减轻海马锥体细胞的受损程度，改善脑缺血再灌注后的神经细胞损伤。3化浊解毒、活血通络方能明显提高CIRI模型小鼠脑组织Ca2+-ATP酶及Na+-K+-ATP酶活性，同时显著降低谷氨酸（Glu）水平，抑制细胞内钙超载、脑水肿的发生，减轻兴奋性氨基酸对脑的损伤，从而起到保护脑组织的作用。4化浊解毒、活血通络方有降低CIRI模型小鼠血清钙调神经磷酸酶（CaN）含量的作用，可抑制钙通道信号引起的细胞凋亡，起到减轻脑缺血再灌注损伤的作用。5化浊解毒、活血通络方高剂量组小鼠神经病理学及生化指标的改善，证实化浊解毒、活血通络方对CIRI有一定的保护作用，且与剂量有关。从实验角度论证了脑缺血再灌注损伤的中医病机主要是痰瘀交阻，本虚标实。而化浊解毒、活血通络法可通过多途径降低CIRI的程度。