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人工授精技术是生猪养殖中的关键环节,需要高质量的常温保存精液,而常温保存稀释液对精液品质具有很大影响,影响精液品质的诸多因素之一就是过量活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的产生。过量的ROS产生会导致精子氧化应激,造成细胞器及质膜损伤甚至损害精子DNA,影响精子的受精能力以及人工授精后母猪的繁殖性能。目前的研究表明,在稀释液中加入适当的抗氧化剂可以有效防止精子的氧化损伤,从而提高常温保存的精液品质。因此,本试验通过在猪精液常温保存稀释液中添加天然抗氧化剂——表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG),并通过对17℃常温保存的第1～5 d的猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率,总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量、活性氧(ROS)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)以及ATP含量、线粒体膜电位(MMP)和琥珀酸脱氢酶(SDH)活性等指标进行测定,研究EGCG的抗氧化性能,分析稀释液中添加EGCG对常温保存猪精液品质的影响,以期对EGCG作为猪精液常温保存抗氧化剂的应用提供理论依据。本试验主要获得以下研究结果:1.猪精液常温保存稀释液中添加不同浓度的(10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L、40μmol/L和50μmol/L)EGCG,对猪精液常温保存均有积极的保护作用。当稀释液中添加20μmol/L和30μmol/L EGCG时可以达到最佳效果,且两组之间无显著差异(P>0.05),添加20μmol/L EGCG组精液17℃保存第5 d的精子活率、质膜完整率及顶体完整率分别达到78.36%、74.17%和63.09%,显著高于对照组和其余处理组(P<0.05);但是,稀释液中添加50μmol/L EGCG组精子活率与对照组相比无显著差异(P>0.05)。稀释液中添加10μmol/L与40μmol/L EGCG组相比,精子活率无显著差异(P>0.05)。2.在猪精液常温保存稀释液中添加不同浓度的EGCG均能够提高精子T-AOC、SOD、CAT活性,降低MDA含量和ROS水平,且与对照组相比差异显著(P<0.05)。稀释液中添加20μmol/L EGCG处理组精子T-AOC、SOD、CAT活性显著高于其他组(P<0.05),MDA含量和ROS水平显著低于其他组(P<0.05)。50μmol/L EGCG处理组的ROS水平和CAT活性与对照组相比无显著差异(P>0.05),但能够显著提高T-AOC和SOD活性,降低MDA含量(P<0.05)。在30、40和50μmol/L EGCG处理组间,精子T-AOC活性、MDA含量和SOD活性相比差异不显著(P>0.05)。另外,在稀释液中添加EGCG常温保存1 d后,其保存效果与对照组相比差异显著(P<0.05),但保存第3 d与第5 d之间的效果差异不显著(P>0.05)。因此,EGCG在猪精液常温保存稀释液中的最佳浓度为20μmol/L,其有效保存时间可达到5 d。3.在猪精液常温保存稀释液中添加EGCG能够不同程度的增强精子的线粒体功能和能量代谢。但是,随着EGCG添加量的增加精液保存效果反而下降。稀释液中添加20μmol/L EGCG保存效果最好,常温保存第5 d时精子的ATP含量、线粒体膜电位、SDH活性分别达到4.4μmol/m L、3.1ΔΨm和69.2 U/m L,均显著高于对照组(P<0.05)。与20μmol/L EGCG处理组相比,EGCG浓度为30μmol/L时精子线粒体膜电位及保存1 d、5 d的SDH活性均无显著差异(P>0.05),ATP含量和保存3 d的SDH活性均显著低于20μmol/L EGCG组(P<0.05),但均优于对照组(P<0.05)。当EGCG浓度为10μmol/L时,保存5 d时精子SDH活性与对照组无显著差异(P>0.05),而ATP含量、线粒体膜电位以及保存1 d和3 d的SDH活性均高于对照组(P<0.05)。当EGCG浓度为50μmol/L时,SDH活性和保存1 d、5 d精子ATP含量与40μmol/L EGCG处理组相比无显著差异(P>0.05),线粒体膜电位及保存3 d的精子ATP含量与其他处理组相比差异显著(P<0.05),并且均优于对照组(P<0.05)。因此,本研究证明在猪精液常温保存稀释液中添加EGCG可以有效提高精液保存质量,且最佳浓度为20μmol/L。稀释液中添加EGCG能够显著提高精子常温保存后的精子活率、质膜完整率、顶体完整率、T-AOC、SOD活性、CAT活性、ATP含量、线粒体膜电位及SDH活性,降低MDA含量和ROS水平。稀释液中添加一定浓度的EGCG对精子有积极的作用,对猪精液常温保存的研究具有重要的意义。