沙棘籽蛋白酶解肽的抗氧化活性、对小鼠的降血糖效果及肾脏保护作用

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沙棘是一种富含多种活性物质的草本植物。沙棘籽蛋白具备显著的降血糖活性,沙棘籽蛋白酶解肽的降血糖活性及其对糖尿病肾功能的影响未见报道。因此,本课题对沙棘籽蛋白进行酶解制备活性肽,并探究其抗氧化、降血糖活性以及对糖尿病肾功能的影响。在本文实验条件下:(1)胰酶(Pancreatin)酶解最佳工艺为酶解温度、加酶量0.35%、酶解时间6 h、酶解p H为11;此条件下,沙棘籽蛋白回收率和水解度分别为75.38%和13.55%;沙棘籽蛋白酶解前后氨基酸百分占比无较大变化。但是沙棘籽蛋白酶解肽的氨基酸总量相比于沙棘籽蛋白下降了14.85%。沙棘籽蛋白酶解肽的分子量显著小于沙棘籽蛋白的肽分子量,酶解后<5 k Da肽分子量占比增加,5~10k Da变化不大,>10 k Da占比减少。(2)探讨了不同浓度的沙棘籽蛋白酶解肽的体外抗氧化效果。结果表明:沙棘籽蛋白酶解肽的抗氧化效果优于沙棘籽蛋白,具有较强的还原力、超氧阴离子自由基、羟自由基的清除能力以及抗脂质过氧化能力,且随浓度增加呈递增趋势,均在最高浓度(1 mg/m L)表现出最强的抗氧化能力;DPPH自由基的清除能力较弱,随着浓度的增加清除能力呈递减趋势,在0.2 mg/m L时具备最大的清除效率为62.55%。对Fe2+-H2O2诱导的小鼠肝脏和肾脏丙二醛的抑制率呈先增后减的趋势,在0.8 mg/m L时达到最大抑制率。(3)沙棘籽蛋白酶解肽的对糖尿病小鼠的降血糖活性及其对肾功能的影响。结果显示:沙棘籽蛋白酶解肽各剂量组(50、150、250 mg/kg/d)均表现出了良好的降血糖活性以及肾脏保护效果,降血糖指数优于沙棘籽蛋白。糖尿病肾病初期引起的肾小球滤过功能障碍(具体表现为尿蛋白、肌酐、尿酸、尿素氮、丙二醛升高),肾小球肥大,基底膜增厚,肾小囊萎缩等症状也得到显著改善,肾脏保护效果以酶解肽低剂量组(50 mg/kg/d)最佳。
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