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花青素是蓝莓中天然存在的一种生物活性物质,具有抗氧化作用、抗自由基作用、抗视力退化、抗癌作用及抗动脉硬化和血栓形成等作用。为了研究蓝莓花青素的护肝作用及其抗氧化机理,本文以蓝莓花青素为研究对象,采用酶解辅助乙醇溶剂提取法提取蓝莓花青素后,用大孔树脂分离纯化粗提液,筛选出分离效果最好的大孔树脂NKA-9,并确定其最佳分离条件;在此基础上,首先进行动物试验,对小白鼠灌胃以蓝莓花青素21d后腹腔注射CCl4,以此诱导小鼠急性化学性肝损伤,采集血液后测定各酶活指标并评价蓝莓花青素对肝损伤的保护作用;其次在动物试验的基础上进行细胞试验,进一步从细胞水平评价蓝莓花青素对CCl4诱导的小鼠急性化学性肝损伤后肝细胞的保护和抗氧化作用,从生物整体和细胞水平评价蓝莓花青素对肝脏的预防和保护作用机理。主要研究结果如下:(1)通过大孔树脂分离纯化蓝莓花青素试验得出:NKA-9大孔树脂对蓝莓花青素表现出良好的吸附与解吸性能,是分离纯化蓝莓花青素的理想树脂。最佳静态吸附条件为:温度40℃,pH4.5时NKA-9对粗提液中花青素吸附量最大;最优解吸条件为:温度30℃,采用70%乙醇浓度时得到的解吸率最大,解吸效果最好。(2)动物试验结果显示,蓝莓花青素可以明显降低CCl4诱导的化学性肝损伤引起的小鼠血浆中ALT(谷丙转氨酶)、AST(谷草转氨酶)及MDA(微量丙二醛)含量水平(均P<0.01),降低其含量;同时还能够提高红细胞中SOD(超氧化物歧化酶)、CAT(过氧化氢酶XGSH-Px(谷胱甘肽过氧化物酶)含量、提高肝糖原水平(均P<0.01),降低由氧化造成的肝脏损伤。试验结果说明蓝莓花青素对CCl4所致氧化损伤的小鼠肝损伤有明显的保护作用。(3)细胞试验结果如下:通过建立CCl4对人肝细胞株L-02的损伤模型,结果表明CCl4诱导肝细胞损伤的最适损伤浓度为20mmol/L,损伤时间为6h,经CCl4损伤后模型组细胞存活率仅为30%,CCl4对肝细胞的损伤程度与给予CCl4的浓度以及作用时间呈正相关。试验还证明了蓝莓花青素可一定程度地改善肝细胞L-02损伤,能明显提高肝细胞的存活率,且浓度越高,效果越好,能减少CCl4所致肝酶ALT、AST、MDA的释放(均P<0.01)。