猪瘟(CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的猪的高度接触性传染病，是猪最重要的传染病之一，给世界各国养猪业带来了巨大的经济损失。 CSFVE2基因编码的E2蛋白为囊膜蛋白，由370个氨基酸残基组成，是CSFV主要保护性抗原蛋白，能够诱导机体产生中和抗体。 本试验设计针对E2基因的特异性引物，通过一步法RT-PCR，以猪瘟兔化弱毒疫苗毒(HCLV)总RNA为模板，扩增获得E2基因，将PCR产物克隆到pGEM-TEasy载体后测序。然后将该基因插入到pFast-BacHTA载体中，构建重组转座载体后转化DH10Bac感受态细胞，获得重组Bacmid后转染sf9昆虫细胞，传毒3代，获得重组表达蛋白。测序结果证实成功克隆CSFVE2基因，其核苷酸序列为1119bp，共编码373个氨基酸，与HCLVE2基因序列和氨基酸序列进行比较，同源性均达到99.74％。经PCR及双酶切鉴定，目的基因正确插入pFast-BacHTA转座载体中，利用载体特异性引物M13进行PCR鉴定，结果证实转座成功构建重组Bacmid。SDS-PAGE电泳结果显示表达E2蛋白分子量约为43KDa，Western-blot和免疫组化结果证实表达蛋白能够被CSFV标准阳性血清识别。ELISA结果证实本试验获得的E2重组蛋白与CSFV标准阳性血清具有较好的反应性。 E2蛋白在Bac-to-Bac杆状病毒系统中的成功表达为开发CSF新型疫苗以及建立相关血清学诊断方法等奠定了基础。