【摘 要】
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目的: B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator, BlyS)是肿瘤坏死因子配体超家族中的新成员,是极强的促B细胞生存因子,能特异的刺激B细胞增殖,分化并分泌IgG, IgA和Ig
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目的: B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator, BlyS)是肿瘤坏死因子配体超家族中的新成员,是极强的促B细胞生存因子,能特异的刺激B细胞增殖,分化并分泌IgG, IgA和IgM等免疫球蛋白,在体液免疫反应中发挥着非常重要的作用。本实验拟通过基因工程的方法将小鼠可溶性B淋巴细胞刺激因子(mouse soluble B lymphocyte stimulator, msBlyS)基因导入到肿瘤细胞中,观察msBlyS能否增强肿瘤细胞的免疫原性,刺激机体产生大量针对肿瘤细胞抗原的自身抗体,产生抗肿瘤的效应。 方法: (1)采用RT-PCR法从BALB/c小鼠脾脏组织总RNA中获得566bp的msBlyS目的基因cDNA。通过TA克隆测序无误,再将其定向连接到pSecTag2B真核表达载体上,转化大肠杆菌XL1-blue。限制性内切酶筛选出阳性克隆pSecTag2B-msBlyS,末端终止法完成msBlyS cDNA的序列测定。 (2)用脂质体包裹纯化的msBly5重组表达质粒,体外分别转染小
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