【摘 要】
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目的: 探讨低氧(3%O2)预处理尿源性干细胞(rabbit urine-derived stem cells;rUSCs)与复合透明质酸胶在促进膀胱组织再生的协同作用。 方法: 收集42只健康、雄性兔尿液以及膀
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目的: 探讨低氧(3%O2)预处理尿源性干细胞(rabbit urine-derived stem cells;rUSCs)与复合透明质酸胶在促进膀胱组织再生的协同作用。 方法: 收集42只健康、雄性兔尿液以及膀胱冲洗液;分离、培养并鉴定rUSCs;低氧处理rUSCs后检测其增值、分泌、凋亡等变化;诱导rUSCs体外向平滑肌、尿路移行上皮方向诱导分化;全层切除兔膀胱40%面积;用等面积经3%过氧乙酸(peracetic acid;PAA)处理过的新鲜猪小肠(porcine small intestines;SIS)修补;自体rUSC、SMC;或rUSC分化后的SMC与复合透明质酸胶(hyaluronic acid-heparin gel; HA gel)混匀后;均匀平铺覆盖于SIS之上;单纯HA gel+SIS作为对照;细胞荧光染料PKH-67标记rUSC;4周后观察其体内存活、分布及分化情况并做再生膀胱功能及组织学检测。 结果: 原代培养约第6~7天可观察到单个、体小、“米粒样”rUSCs克隆形成. rUSCs在体外能够高效地分化为尿路移行上皮细胞及平滑肌细胞;4周后尿流动力学结果显示实验组再生膀胱之容量、顺应性较对照组;均有大幅度提高;同常氧培养条件相比;rUSCs在低氧条件下能获得明显更多的细胞克隆;且其增值能力;旁分泌功能等明显优于常氧条件下的rUSCs;而凋亡现象减弱;低氧rUSC组PKH-67标记细胞存活率明显高于常氧rUSC组;组织学检测提示实验组上皮组织、平滑肌肌束再生等亦好于对照组;且低氧组再生效果相对于常氧组显著提高。 结论:1)3%O2低氧条件培养;能够提高rUSCs增殖、分泌功能;而抑制其早期凋亡的发生;2)低氧预处理能增加rUSCs在体内的存活率;从而促进兔膀胱肌肉组织的再生;3)透明质酸胶与rUSCs合用;有效地增加了移植膀胱组织的再生。
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